Клик кляк фото: Диван клик кляк — фото необычных идей оформления дизайна
Диван клик кляк — фото необычных идей оформления дизайна
Нередко диван клик-кляк причисляют к виду диванов книжек. Здесь дело в схожести механизмов, однако подобная мебель представляет собой более усовершенствованную форму.
А так же внешне подобный диван выглядит значительно симпатичнее.
Новинкой данной серии является сменный чехол, позволяющий не только заменять дизайн дивана клик-кляп, но и вид интерьера в целом.
Оглавление статьи:
Плюсы дивана серии клик-кляк
Главным плюсом являются его ортопедические характеристики, которые проявляются благодаря специальному каркасу, со встроенными в него ламелями из дерева. Наилучший эффект возможен при использовании ортопедического матраса, который без труда заменит заводское покрытие.
Немаловажный фактор — это способность трансформироваться в один из возможных вариантов. Положение сидя и лёжа это не предел для спинки, она имеет возможность принимать промежуточное положение с помочью специфичного механизма дивана клик-кляк.
Взглянув на фото дивана клик-кляк, стоит заметить, что это единственная мебель, способная трансформироваться подобным образом. Подлокотники также оборудованы подобным механизмом.
Критичных недостатков в данной серии попросту нет. При размещении более старых моделей диванов клик-кляк в интерьере не стоит ставить его вблизи стен, т.к. потребуется отодвинуть диван, чтобы разложить его. Но данный минус был учтён в более новых моделях, в которых спинка сама отдаляется от стенки и подвигается к человеку.
Принцип трансформации
Хорошо известный многим принцип «книги» используется в диване клик-кляк. Требуется ухватиться за край сиденья, поднять его до характерного щелчка и после опустить. Чтобы вернуть мебель в исходное положение требуется выполнить аналогичные действия.
Сделав то же самое с подлокотниками вы получите предельно ровную поверхность для комфортного отдыха.
В подлокотники встроены отдельные храповые механизмы, что даёт некую степень свободы и позволяет придавать им различные положения от подставки для локтей до поддержки для головы. Но не стоит всем этим сильно обольщаться.
Подобный механизм довольно хрупок, выдерживает всего лишь 30 кг максимального веса. Так что лучше воздержаться от «сидений» на подлокотниках и тогда они прослужат вам долгие годы.
Каркасная база
Каркас дивана скомбинирован из:
- дерева;
- металла;
- ламинированной МДФ;
- ДМП.
Каркасные латы как правило устилаются дощечками из гибкого и эластичного бука.
Внутреннее наполнение
Наполнитель может быть абсолютно различен, в данном случае покупателю предоставляется выбор исходя из его личных потребностей. Наполнение может состоять пружин, либо без них. Первый случай подразумевает блоки с пружинами или отдельно стоящие пружинки, а второй случай предполагает наличие одного из этих материалов:
- холофайбер;
- натуральный латекс;
- пенополиуретан;
- синтепон.
Место для сна имеет особенные параметры. Оно должно одновременно сочетать в себе и жесткость, и мягкость, и упругость. Учитывайте их при выборе — это гарантия безупречного сна и приятного пробуждения.
Уход за диваном
Как и любой механизм диван трансформер так же требует ухода за собой. Причиной наибольшего количества неполадок может служить простое отсутствие смазки деталей.
Из-за этого усиливается нагрузка от трения и механизм быстро изнашивается. Так же возможна деформация и появления изгибов. Во избежание всего этого стоит иногда обрабатывать детали густым техническим маслом, стоит уделить внимание клёпкам.
В случае замены одного из механизмов следует заменить ещё парный ему, для равномерного износа, чтобы не возникали серьёзные проблемы.
В заключение хотим сказать, что это один из самых лучших видов диванов в среднем ценовом сегменте.
Фото диванов клик кляк в интерьере
преимущества и недостатки (советы по выбору)
Диван клик-кляк выделяется практичностью и комфортабельностью, поэтому он пользуется большой популярностью у покупателей. Фурнитура, работающая на данном механизме отличается удобством трансформации и имеет три положения спинки: лежа, полусидя и сидя. Название мебели дали за щелчки при трансформации.
“При всем удобстве и легкости в применении, диван с использованием системы клик-кляк не отличается высокой ценой”
Он хорошо впишется в интерьер вашей гостиной или спальной, где можно отдохнуть после работы. Перед первым складываением следует прочитать инструкцию по работе этого механизма, приложенную с товаром. Правильно подобранная тахта под свои нужды, сможет подарить массу положительных эмоций.
Преимущества и недостатки
Диван-книжка пользуется популярностью из-за своего удобного механизма, но он обладает и другими плюсами:
- Современный и привлекательный вид. Красивый дизайн, позволяет вставить клик-клак в любую комнату, в независимости от особенностей интерьера;
- Большой срок эксплуатации – части выполнены из прочной стали, которая может выдержать большие нагрузки в течение долгого времени;
- При разборке дивана в ровное положение, поверхность не деформируется в ямы или бугры;
- Каркас обладает ортопедическими свойствами;
- Удобен в размерах – обладает сам по себе небольшими габаритами, поэтому с легкостью сможет найти себе место и в маленьких помещениях;
- Наличие внутренних ящиков, куда запросто поместится постельное белье.
Несмотря на все свои плюсы, эта мебель имеет и некоторые минусы. Диваны с механизмом клик-кляк, нужно устанавливать так, чтобы оставалось место между задней спинкой и стеной, это без затруднений разложить его. В противном случае, диван придется отодвигать от стены, чтобы была возможность его полностью разложить. Из-за этого придется постоянно следить, чтобы сохранять необходимое пространство.
На видео: механизм “клик-кляк”.
Как выбрать диван
Чтобы выбрать диван-трансформер и правильно его разместить, необходимо учесть следующие рекомендации:
- Если вы собираетесь поставить мебель на кухне, то нужно отказаться от подлокотников для создания удобства;
- Если вы приобретаете диван для ребенка, то перед покупкой дайте ему попробовать разложить заинтересовавшую модель, чтобы трансформация не вызывала никаких трудностей в будущем;
- Поролон и синтепон неудбны для чистки, поэтому лучше выбирать модели с другими видами наполнителей. ;
- Наличие ортопедического матраса будет отличным выбором, но учитывайте, что стоимость такой модели куда выше, чем обычной.
Прочтите несколько советов, которые помогут приобрести качественную мебель:
- Осмотрите сам механизм трансформации и попробуйте разложить диван. Если процедура не вызывает вопросов, то к этой модели можно присмотреться;
- Посмотрите на качество обивки, материал должен быть плотным и жестким. Так же обратите внимание на внешние дефекты ткани, чтобы отсутствовали затяжки и загрязнения;
- Встроенные ящики должны иметь хорошую вместимость;
- Осмотрите крепления, они должны быть плотно соединены и не иметь никаких трещин и расхождений.
Уход за мягкой мебелью
Если вы хотите надолго сохранить внешний вид, то приобретите специальный чехол для дивана, который защитит трансформер от грязи и пыли. Чтобы не изнашивался механизм конструкции, смазывайте его маслом. В противном случае, он будет постепенно хуже трансформироваться, что неизбежно приведет к поломке дивана. Когда механизм работает без смазки, возрастает трение между движущимися частями. В итоге появится люфт, и части дивана будут перекошены, что приведет к ухудшению трансформацию.
Смажьте техническим маслом части дивана непосредственно после покупки. Жидкость должна быть достаточно густой, в таком случае, повторно выполнять эту операцию придется куда через больший срок, чем при использовании водянистого раствора. Чтобы смазать детали для начала закройте отдел белья. Далее смажьте две клепки по очереди: ту, которая находится между рамами, затем ту, что соединяет сиденьм и бельевой ящик.
“Если при трансформации дивана он щелкает только с одной стороны, причиной является вторая часть, которая просто застряла. На механизм будет идти двойная нагрузка, поэтому как можно быстрее устраните поломку”
Диван с подлокотниками
В целом все модели дивана клик-кляк делятся на два типа – с подлокотниками и без. Перед покупкой хорошо обдумайте, нужны ли вам подлокотники или они будут мешать. Из положительных качеств подлокотников:
- Возможность регулировать уровень подлокотников – можно либо полностью опустить, либо приподнять. Во втором состоянии подлокотники могу заменить подушку;
- При разборе дивана-кровати клик-кляк на двух человек, можно увеличить длину спального места при помощи подлокотников;
- Если вы разложите подлокотники, выделится место, куда можно поместить постельное белье.
Материалы обивки
При обивке дивана применяются различные виды обивки, самое главное качество которых – прочность. Материалы, применяемые при обивке:
- Гобелен – применяется на протяжении многих лет с древних времен, благодаря запасу прочности. Такая ткань способна выдержать высокие нагрузки и практически не рвется. Материал имеет стильный дизайн и является экологически чистой. В ткани содержится 60-80% хлопка;
- Флок – применяется при обивке дивана. Обладает повышенной прочностью и устойчивостью к стираниям. По своему виду очень похож на бархат. В составе содержится около 35% натурального хлопка. Такой вариант сможет выдержать когти домашних животных;
- Жаккард – имеет прочную структуру и высокую плотность. Модели диванов с такой обивкой сделаны в ярком стиле, который может сохранять внешний вид на долгое время. Ткань имеет защитные свойства против выгорания и не подвержена стираниям;
- Шенилл – самый распространенный материал, использующийся при обшивке диванов. В свойствах ткани сочетаются высокая плотность и прочность.
“Перед покупкой проверьте качество материала. Достаточно ощупать диван, если кушетка приятная на ощупь, а на краях нет дефектов (стертые бока, проблемы без тканей и т.д.), то можно смело приобретать мебель”
Единственным минусом для владельца может стать процесс его закрытия, он требует небольшой сноровки и приложения усилий. Многие диваны клик-кляк (на фото) у их владельцев, стоят в разобранном виде, ведь большинству мебели не нравится ежедневно повторять эту операцию.
Еще одним минусом является конструкция, она не позволяет устанавливать трансформер в небольшие помещения. Если же принято решение о приобретении дивана клик-кляк в маленькую комнату, то места в ней практически не останется.
Диван с механизмом “клик-кляк” (2 видео)
Модели диванов с механизмом “кляк-кляк” (28 фото)
Вам также будут полезны эти статьи:
Диван клик кляк — 80 фото идей красивого дизайна
При выборе дивана люди чаще обращают внимание на его эстетические характеристики, это не совсем правильно.
Но кроме внешнего вида диван должен быть удобным, прочным и качественным. Диван клик – кляк прекрасно подходит под эти качества.
«Клик-кляк» = «книжка»?
Иногда диван клик – кляк относят к виду диван – книга. И правда, они похожи своим механизмом, но диван клик – кляк более современный, красив внешне и удобный.
Для моделей данного дивана есть съёмные чехлы, это новинка, которая стала востребованной очень быстро.
Ведь это очень удобно. Таким образом, их можно легко постирать при загрязнении или если вам надоел старый цвет, то надеть чехол любой расцветки и вот ваша комната вновь изменится.
Плюсы и минуса дивана клик – кляк
Главным достоинством данного дивана считается ортопедический каркас. При пользовании ортопедическим матрасом хорошо чувствуется весть его эффект и удобство.
Диван клик – кляк можно подобрать на свой вкус и под свои физические особенности. Это единственный диван с такой функцией.
Так же еще одна его особенность, это то, что он складывается для положения на нем полу сидя. Это единственный диван с такой функцией. Поэтому удобнее дивана не найти.
Подлокотники данного дивана так – же регулируются, как пожелается.
Большой выбор оттенков дивана клик – кляк никого не оставит равнодушным. Такой диван впишется в любой интерьер квартиры.
Больших недостатков у данного дивана не имеется. Ну если только то, что такой диван нельзя ставить вплотную к чему либо, так, как ему нужно место для трансформации. Но эт не очень большой минус, ведь положительных моментов куда больше.
Да и этот недостаток решился в более современных вариантах, при трансформации диван отталкиваясь от стены сам отъезжает на необходимое расстояние, чем экономит силы и время хозяев.
Трансформация
Что бы диван клик – кляк превратился в полноценную кровать, всего лишь необходимо поднять сидение до щелчка. Спать на таком диване удобно и комфортно.
Подлокотники у дивана клик – кляк безумно удобны. Их можно сделать в любом положении. Для отдыха их можно привести в вертикальное положение, для удобства рук, для сна их можно сделать горизонтально.
Есть у них только небольшой недостаток, механизм очень слабый. Если подлокотники приведены в вертикальное положение, на них нельзя садиться, допустимый вес для них в таком положении только тридцать килограмм. Если соблюдать все рекомендации и нюансы, диван будет служить долго и верно.
Каркас у такого дивана собран из дерева, металла, мдф, дмп.
Наполнение дивана довольно разнообразное. При покупке вы сможете выбрать сами наполнитель, который вам больше понравится.
Обивка
Обивка будет применяться в зависимости от назначения дивана и места его обитания. К примеру в местах, где сидят на диване мало, можно сделать ткани более маркие и красивые.
А в местах с частым соприкосновением с диваном нужен материал прочный и долговечный, который будет долго служить и не изменит свой внешний вид. На кухне кроме стойкости материал должен хорошо чиститься от грязи.
Необходимо предусмотреть будут ли попадать прямые солнечные лучи на обивку дивана.
Уход за клик-кляком
Данный диван, как и любой другой предмет мебели, необходимо правильно содержать и ухаживать за ним. В большинстве случаев диван перестает функционировать, как раньше из-за отсутствия смазки в механизме. Без смазки при нагрузках от трения диван быстро изнашивается.
Заключение
Диван клик – кляк, это очень качественная мебель, он многофункционален, практичен и удобен. Ортопедическая конструкция обеспечивает здоровый отдых и сон на данном диване.
Фото диванов клик-кляк в интерьере
Диван клик-кляк (37 фото): практичность и комфорт в 3 щелчка
Благодаря разнообразию цветов и фактур обивки, можно подобрать идеальный диван клик-кляк почти к любому интерьеру
В мире наверняка не осталось квартиры или дома, в котором нет дивана.
Содержание
Диваны с механизмом клик-кляк: новое слово в мягкой мебели
Система трансформации «клик-кляк» считается сравнительно молодой и для многих оказывается новинкой. Придуманная французскими мебельщиками технология раскладывания мебели представляет собой целостную систему, отличающуюся надежностью, простотой и бесшумностью.
Хороший диван — это не только удобная мебель, но и важный элемент интерьера
Именно эти качества нового механизма гарантируют ему такую популярность, и сегодня во многих домах вместо привычных громоздких диванов и кресел можно встретить компактные и функциональные клик-кляк диваны.
Компактность дивана клик-кляк является одним из его основных преимуществ
По большому счету, клик-кляк – это более современная и усовершенствованная версия дивана «книжка»: если в «книжке» было только два положения, то новые модели позволяют располагать спинку в трех положениях:
- Лежа – обеспечивает превращение дивана в полноценное и комфортное спальное место.
Всего пара простых движений, и компактный диван превращается в роскошное, просторное место для сна
- Сидя – самое функциональное положение, оптимальное для традиционного дивана. Подходит для просмотра фильмов или чтения.
Диван клик-кляк комфортен в любом из своих положений
- Полусидя (спинка располагается под углом 45 градусов) – наиболее удобное положение для расслабления спины и шеи.
«Полусидя» — идеальное положение для релакса и просмотра любимого фильма
В некоторых моделях есть возможность не только менять положение спинки, но и трансформировать боковины, придавая им наиболее привлекательное положение. Таким образом можно сформировать подлокотники у дивана в положении сидя или приподнять подголовник в положении лежа.
В этом чудо-диване раскладываются даже боковины
Еще больше простора для отдыха
Особенности механизма клик-кляк
Преобразование дивана из одного положения в другое производится предельно просто: чтобы из сидячего положения сделать кровать, следует приподнять сидение вверх до того момента, когда спинка окажется в горизонтальном положении и механизм зафиксируется. Затем можно опускать сидение.
Наличие пространства сзади дивана поможет не передвигать его при частом раскладывании
В разложенном положении такой диван не уступает по ширине хорошей кровати
СОВЕТ! Процесс складывания дивана столь же прост, только проделывается в обратном порядке. Важно помнить, что все должно происходить максимально мягко и плавно, только в таком случае механизм будет работать адекватно.
Сдержанно, лаконично и стильно
Если же не опускать спинку до конца, а остановиться после первого характерного щелчка механизма, то диван окажется зафиксированным в положении полусидя. Полученный в таком случае диван идеально подходит для релакса, поскольку такой наклон спинки в сочетании с ортопедической основой считается оптимальным положением для позвоночника.
Положение релакс поможет быстро восстановить силы после тяжелого дня
Именно тип раскладывания клик-кляк позволяет соединять в одном изделии все желаемые положения.
Схема манипуляций с диваном
Советы по грамотной эксплуатации дивана
Чтобы диван прослужил подольше и радовал владельцев хорошей работой, за ним, как и за любым механизмом, следует ухаживать с особой тщательностью:
- Сам механизм дивана должен быть всегда смазан, поскольку чаще всего ломаются именно плохо смазанные диваны.
Механизм клик-кляк
- Для смазывания следует использовать фабричные масла и обрабатывать сразу все шарниры.
- Если механизм на диване требует замены, то специалисты рекомендуют менять обе стороны сразу – так диван прослужит дольше.
- Специалисты советуют следить за звуками, которые издает диван в процессе складывания: щелчок только с одной стороны сигнализирует о неверной работе механизма. Если это вовремя не заметить, то при эксплуатации одна из сторон может не выдержать нагрузки.
Анатомия дивана с механизмом клик-кляк
СОВЕТ! Переводите механизм в другое положение крайне аккуратно и придерживаясь рекомендаций – в таком случае диван прослужит дольше.
Благодаря ярким акцентам в виде подушек, темный диван очень гармонично смотрится в светлом интерьере
Чем привлекательны диваны с этой системой?
Специалисты, говоря о привлекательности диванов с системой клик-кляк, отмечают следующие достоинства этой мебели:
- Практичность, обеспеченную возможностью выбирать одно из трех положений.
Адаптируйте диван под Ваши потребности, изменяя положение отдельных частей
- Долговечность, которая гарантирует надежную работу механизма на протяжении 10 лет при условии соблюдения правил пользования мебелью.
Темный диван на металлический ножках отлично вписывается в современный интерьер
- Комфорт ровного спального места для двух взрослых людей.
Днем спальное место прекрасно трансформируется в комфортную зону отдыха
- Удобство хранения постельного белья или других вещей в нижнем ящике.
В некоторых моделях диванов клик-кляк нет ниши для белья
- Простота ухода (чехлы с самого дивана и с прилагаемых к нему подушек легко снимаются для стирки в машине-автомате).
Сменные чехлы значительно облегчают перемены в интерьере и уход за диваном
Сменность чехлов и удобство конструкции делают диван клик-кляк хорошим вариантом для детской
Однако, несмотря на множество плюсов, подобный механизм не лишен и недостатков. Одним из наиболее весомых считается необходимость выдвигать диван на свободное место при раскладывании: это доставляет определенный дискомфорт, особенно в условиях небольших квартир, для коих и приобретаются эти функциональные диваны-кровати.
Диван клик-кляк отлично выглядит в классическом интерьере или в арт-деко
Но обычно эту проблему решить несложно. Куда более весомой проблемой, которую приходится решать дополнительно, считается относительная хрупкость механизма, не терпящего некорректного обращения и грубой силы. Также владельцы диванов отмечают, что со временем механизм подъема боковин ослабляется и перестает работать.
Возможность подъема боковин значительно увеличивает функциональность дивана
Светлый диван с лаконичными формами идеально впишется в интерьер хай-тек или минимализм
Диван с механизмом клик-кляк можно считать разумным приобретением для любителей новых технологий, в условиях малогабаритных квартир и в случае необходимости в краткие сроки получить дополнительное спальное место. Особым вниманием пользуются такие диваны у молодежи благодаря широкому ассортименту расцветок и удобству раскладного механизма.
диван клик-кляк для вашего комфорта фото
Сегодня вряд ли можно представить домашний уют без мягкого дивана. Пожалуй, это самый удобный и практичный вариант обустройства мягкой мебелью гостиной, спальни и даже кухни. Модельные и угловые, раскладные и простые, трехместные и одноместные, с широким ассортиментом расцветок варианты позволяют выбрать оптимальную модель для любого интерьера.
В современное время все больше популярными становятся диваны с механизмом клик-кляк, сочетающие в себе максимальную функциональность и стильный внешний вид.
Диван с механизмом клик-кляк: особенности использования
Подобная система трансформации для многих оказывается абсолютной новинкой. Технология придумана во Франции и представляет собой целостный механизм, отличающийся простотой, бесшумностью и надежностью. Именно благодаря этим качествам конструкция клик-кляк стала такой популярной. Действительно, сегодня во многих современных квартирах и домах вместо традиционной громоздкой мягкой мебели встречаются функциональные и компактные диваны клик-кляк.
По сути, клик-кляк – это более усовершенствованная модель дивана “книжка”. Основное отличие в возможностях трансформации: если “книжка” могла принять только два положения, то конструкция клик-кляк позволяет разложить диван в трех положениях:
- сидя – самое оптимальное и функциональное положение для стандартного дивана, идеальный вариант для чтения и просмотра фильмов;
- лежа – диван превращается в полноценное спальное место;
- полусидя – спинка принимает положение под углом 45°, оптимальное положение для расслабления и комфорта шеи и спины.
В некоторых версиях дивана с системой “клик-кляк” есть возможность помимо трансформации спинки, менять боковины, придавая им самое удобное для вас положение. Так, можно легко приподнять подголовник дивана в положении лежа или сформировать подлокотники в положении сидя.
Принцип работы механизма клик-кляк
Преобразование конструкции дивана в то или иное положение производится очень просто: сделать кровать из сидячего положения можно приподняв сидение вверх до момента, пока спинка окажется четко в горизонтальном положении, а сам механизм зафиксируется. После чего следует опустить сидение.
Процедура складывания дивана также проста, только производится в обратном порядке. Очень важно обращаться с механизмом максимально плавно и мягко, только так он прослужит вам долгие годы.
Если спинку до конца не опускать, остановившись после первого щелчка, характерного для механизма, то конструкция окажется зафиксированной в положении полусидя. В таком виде диван прекрасно подойдет для расслабления, поскольку наполовину опущенная спинка в сочетании с ортопедическим матрасом является самым благоприятным положением для позвоночника.
Именно принцип механизма клик-кляк сочетает в одном диване все комфортные для человека положения.
Рекомендации по правильной эксплуатации дивана клик-кляк
Чтобы стильный диван служил как можно дольше, за ним нужно тщательно ухаживать:
Механизм любого дивана должен быть хорошо смазан. Для этого важно использовать качественные фабричные масла. Если механизм потребует замены, лучше всего поменять сразу обе стороны – так конструкция прослужит дольше.
Также следует предпринять меры, если вы слышите звуки при складывании дивана: незначительный щелчок уже сигнализирует о неправильной работе механизма. Важно вовремя это заметить, иначе в процессе эксплуатации одна сторона может не выдержать нагрузки.
Совет: переключайте механизм на другое положение очень осторожно и придерживайтесь вышеперечисленных рекомендаций – так диван прослужит намного дольше.
Достоинства стильного дивана клик-кляк
Чем же так привлекателен этот диван? Перечислим основные его преимущества:
- практичность – возможность выбирать положение лежа, сидя или полусидя;
- долговечность – гарантия надежного механизма при правильной эксплуатации;
- ровное комфортное спальное место для двоих;
- удобное хранение постельного белья и прочих вещей в ящике снизу;
- простота ухода – чехлы с дивана и подушек легко снимаются и стираются в стиральной машине.
Наряду с достоинствами следует отметить и некоторые недостатки подобной мебели. Многие акцентируют внимание на том, что каждый раз при раскладывании приходится выдвигать диван, что доставляет определенные неудобства, особенно в условиях малогабаритных помещений, для которых, собственно, и приобретаются такие функциональные диваны.
Но эта проблема вполне решаема. Куда более существенным недостатком считают относительную хрупкость самого механизма, который не выносит грубой силы и неграмотного обращения. Помимо этого, владельцы диванов говорят, что со временем подъемный механизм боковин ослабевает и перестает работать.
Диван клик-кляк – действительно разумное приобретение для малогабаритных квартир и любителей мебельных новшеств. Это прекрасная возможность в любой момент получить еще одно спальное место. Благодаря удобному механизму, разнообразию материалов изготовления и широкой цветовой палитре, особенно полюбились такие диваны молодежи.
Современный практичный диван клик-кляк — фото примеров
Диван. Зачастую его выбор определяют исключительно эстетические качества, но это не совсем правильно. Ведь, кроме того, что этот предмет мебели должен быть красивым, ему еще нужно быть удобным и практичным. Всем этим требованиям отвечает диван клик-кляк, так что, пролистывая интернет-странички с ассортиментными предложениями, обратите на него особое внимание.
«Клик-кляк» = «книжка»?
Частенько модели клик-кляк относят к группе диванов-книжек. И действительно, механизм действия у них схож, вот только первый вариант является боле усовершенствованной формой. Изделия этой серии намного привлекательнее по внешнему дизайну. В их конструкции нередко можно видеть стильные хромированные ножки.
Диваны “клик-кляк” с хромированными ножками
Ноу-хау моделей стали съемные чехлы, которые можно в ассортименте докупить отдельно и с их помощью изменять внешний вид не только дивана, но и всего убранства интерьера, приводя его в соответствие своему настроению.
Благодаря съемным чехлам, диван впишется в любой интерьер
к оглавлению ↑Диван клик-кляк: за и против
Основным преимуществом диванов этой серии являются их ортопедические свойства, за которые отвечают специфически обустроенные каркасы, снабженные деревянными ламелями. Максимально анатомический эффект проявится при использовании ортопедического матраса. У вас будет возможность подобрать модель последнего в соответствии с особенностями своего организма.
Диван “клик-кляк” с ортопедическим матрасом
Следующим фактором, говорящим в пользу клик-кляка будет возможность его трансформации в нескольких вариантах. Его можно видеть не только в разложенном или собранном виде, но и в промежуточном положении, позволяющем находиться на нем, в положении полусидя. Это единственный диван-трансформер, который приводится в такое положение, поэтому более практичную модель и искать не стоит.
Система раскладки дивана “клик-кляк”
Еще одной находкой диванной конструкции стали подлокотники, положение которых также регулируется и фиксируется в нескольких ракурсах.
Диван клик-кляк с подлокотниками
Не оставляет равнодушными покупателей и разнообразие цветового и экстерьерного дизайна изделий. Это делает диван клик-кляк желанным гостем любого интерьера.
Разнообразие расцветок позволяет без труда подобрать диван к любому стилю интерьера
Явных недостатков у данной конструкции мягкой мебели, в общем-то, и нет, разве что вспомнить о том, что диван нельзя поставить вплотную к стене, так как для его трансформации в спальное место нужно будет свободное пространство, а двигать его каждый раз – удовольствие сомнительное. Но и этот недоразумение в современных моделях ликвидировано. Благодаря обновленному механизму трансформирования диван при раскладывании самостоятельно отъезжает от стены, не требуя от владельца лишних усилий по своему перемещению.
Трансформация дивана клик-кляк
к оглавлению ↑Трансформационный принцип
«Для того чтобы диван клик-кляк стал кроватью, достаточно взяться за край сидения и поднимать его вверх до тех пор, пока не прозвучит щелчок»
По сути, принцип действия механизма клик-кляка нам хорошо знаком, потому что он аналогичен «книжному». Для того чтобы диван клик-кляк стал кроватью, достаточно взяться за край сидения и поднимать его вверх до тех пор, пока не прозвучит щелчок. Затем сидение возвращают в исходное положение. В ходе опускания оно потянет за собой спинку, которая примет горизонтальное положение. Если в этот момент сидение приподнять повторно, спинка установится в промежуточной позиции, под сорока пяти градусным углом. В таком виде диван обеспечивает полноценный релакс. Отдыхать в полу лежачем положении всегда комфортнее.
Сборка дивана клик-кляк
Вернемся к спальному месту. Оно у дивана данной конструкции довольно широкое и, непривычно для диванов, ровное. То, что его составляют отдельные части, практически не ощущается.
Спальное место диванов клик-кляк довольно широкое
Подлокотники
Эти части у клик-кляка заслуживают отдельного внимания. Всторенные в них храповые механизмы, позволяют приводить их в разнообразное положение и использовать не только по прямому назначению – в качестве подставок для рук, но и в роли подголовников.
Подлокотники дивана клик-кляк можно использовать, как подголовники
Ложку дегтя в эту сладкую картину добавляет хлипкость поворотных механизмов. На подлокотники, выставленные в вертикальном положении, нельзя присаживаться. Дело в том, что допустимая нагрузка на эти части дивана клик-кляк всего 30 кг. Если не забывать об этих ограничивающих цифрах, то конструкция прослужит долгие годы.
Каркас
У диванов этой серии каркас комбинированный. Его собирают из:
1. Дерева.
2. Металла.
3. Ламинированной МДФ.
4. ДМП.
На каркасные латы в основном используют гибкий и эластичный бук.
Стандартный каркас дивана клик-кляк
Наполнение дивана
Наполнителем для дивана клик-кляк могут служить разные компоненты. Покупатели могут выбирать наиболее удовлетворяющие их запросам варианты. Наполнение может быть:
1. Пружинным.
Диван клик-кляк с пружинным матрасом
2. Беспружинным.
Диван клик-кляк с беспружинным матрасом
В первом случае устанавливаются пружинные блоки или отдельно стоящие пружины. Во втором материалом наполнения станут:
1. Холофайбер.
2. Натуральный латекс.
3. Пенополиуретан.
4. Синтепон.
Спальное место – место особое и характеристики у него соответствующие. Оно должно быть одновременно и жестким, и мягким, и упругим.
Спальное место должно быть одновременно и мягким и упругим
Место для сна хорошего качества – это гарантия спокойного отдыха и отличного настроения при пробуждении.
к оглавлению ↑Обивка
«Жаккард очень хорош для дивана клик-кляк, предназначенного для релакса, так как тактильно приятен»
После того, как вы определились с формой дивана клик-кляк и его размерами, наступает время присмотреться к обивке. Что должно стать ориентиром? Предмет нужно гармонично вписать в обстановку, за ним не должно быть сложно ухаживать и он как можно дольше должен сохранить свою первозданную красоту.
Обивка дивана клик-кляк должна соответствовать интерьеру
Тип обивки будет напрямую зависеть от функционального предназначения помещения, куда диван планируется установить. Например, в кабинет или холл, где на диван садятся редко, можно поставить изделие с отделкой более нежными и маркими тканями. А вот в гостиной такой ход будет неоправданным. Обивка здесь должна обладать высокой износостойкостью и длительно противостоять истиранию. На кухне же, кроме износостойкости, к обивке дивана клик-кляк будет предъявлено такое требование как легкость в чистке, потому что от случайных загрязнений его поверхность там застрахована точно не будет.
Обивка дивана должна быть износостойкой
Важно и непосредственно место, куда планируется установить мебель. В солнечном уголке плохо будет чувствовать себя кожа, не выносящая попадания прямого солнца, Жаккард не приживется на кухне, потому что любое пятно закрепится на нем намертво. Капризен и велюр. Ему не нравится ни влага, ни пылесос. Тем не менее, эти материалы в обивке не редкость.
Тип обивки напрямую зависит от помещения, где будет установлен диван
Что еще часто используют для декора дивана так это:
1. Флок.
2. Гобелен.
3. Шенил.
Теперь попробуем охарактеризовать каждый вид обивочной ткани.
Флок
Этот материал – попытка сымитировать бархат, причем довольно удачная, как говорит внешний вид и ощущения. Ткань жесткая, плотная, не знает выгорания, легко чистится и вполне водоустойчива.
Диван клик-кляк с обивкой из флока
Жаккард
Очень хорош для дивана клик-кляк, предназначенного для релакса, так как тактильно приятен. Текстура ткани – переплетение искусственных и натуральных нитей, что порождает оригинальные рисунки и цветовые сочетания.
Диван клик-кляк с практичной обивкой из жаккарда
Велюр
Ворсистое, нежное, привлекательно блестящее покрытие. Это наиболее популярный вид обивки, хоть отнюдь не дешевый. Такой диван прослужит не долго, ухаживать за ним будет сложно, но его красота затмевает все эти нелицеприятные качества обивки. Последующие несколько лет вы проведете в комфорте.
Диван клик-кляк велюровый
Гобелен
В составе этого материала львиную долю занимает хлопок, поэтому его относят к натуральным. Покрытие из него дышащее, экологичное. Смотрится диван клик-кляк в таком исполнении дорого. Ткань отлично реагирует на стирку, так что подобные модели можно ставить как в гостиных, так и в кухнях.
Диван клик-кляк гобелен
Шенил
Приятно мягкий текстиль, напоминающий по структуре вельвет. Хорош не только для гостиных, но и для детских. Не поглощает запахи, не аллергичен, не выцветает, не вытягивается, однако очень легко покрывается зацепками. В домах, где содержат животных, такую обивку лучше не использовать.
Диван клик-кляк с обивкой из шенила
Кожа
Обивка из серии элитных. Изделия обтянутые ею всегда дорогостоящи, но высокая цена сполна компенсируется качеством и долгой службой диванов.
Кожаный диван системы клик-кляк
к оглавлению ↑Цветовые тонкости
Выбрав диван не совсем того цвета, к счастью, вы не совершите фатальной ошибки, потому что на помощь всегда готовы прийти связующие звенья декоративной цепи – подушки. Не скупитесь на их покупку. Эти милые элементы придадут вашему дивану клик-кляк, который, казалось бы, должен стать изгоем обстановки, невероятную прелесть.
Подушки сделаю диван клик-кляк уютнее
Необычный диван яркого цвета может стать интерьерным акцентом. При желании сделать пространство более логичным и гармоничным – сбалансируйте его шторами ковриками, картинами и другими яркими аксессуарами.
Диван клик-кляк, как интерьерный акцент
Настоящим декораторским раем станет белый диван. Он выдержит любое разноцветное безумие, которое будет его окружать. Данный предмет мебели станет «чистым холстом», с которого вы начнете творить атмосферу комнаты.
Роскошный белый диван клик-кляк
к оглавлению ↑Уход за клик-кляком
Механизм дивана клик-кляк требует определенного ухода, впрочем, как и любой другой. Что чаще всего становится причиной его выхода из строя? Банальное отсутствие смазки. Без смазки нагрузка от трения на конструкционные элементы механизма возрастает и это приводит к ускоренному износу. Появляются перекосы, что лишает возможности беспрепятственно трансформировать изделие.
Деталь дивана клик-кляк, нуждающаяся в регулярной смазке
Неприятности можно избежать, если периодически обрабатывать действующие части техническим маслом повышенной густоты.
В обязательном порядке так обрабатываются клепки, фиксирующие механизм в коробке каркаса и сидению.
Места смазки механизма клик-кляк
Иногда при трансформации мебели характерный щелчок раздается лишь с одной стороны. Это сигнализирует о том, что второй механизм уже вышел из строя и требует замены. Правильно выполнять ремонт, меняя трансформирующие конструкции одновременно с обеих сторон. Таким образом, в последующем их износ будет равномерным, а при раскладывании дивана не возникнет проблем.
к оглавлению ↑Заключение
Диван клик-кляк – это практичность, компактность, надежность и самое главное – комфорт и забота о здоровье. Ортопедическое основание и матрас обеспечат позвоночнику правильное положение в процессе сна, что стане отличной профилактикой бича столетия – остеохондроза. Полезная красота непременно должна появиться в вашем доме.
Фотогалерея – диван клик-кляк
к оглавлению ↑Видео
youtube.com/embed/XHk14enXzV4?feature=oembed» frameborder=»0″ allowfullscreen=»»/>
Автор: Михаил Бонд
Рейтинг:
Загрузка…
Понравился пост? Поделись с друзьями!
механизм, плюсы и минусы + фото в интерьере
Что такое клик-кляк?
Механизм был придуман на базе простой всем известной книжки. Специалисты из Франции ставили перед собой задачу усовершенствовать конструкцию и упростить процесс раскладывания. Нужно признать, им это отлично удалось.
Свое название диван клик-кляк получил из-за звука, получаемого при трансформации механизма из сиденья в кровать.
На фото пример как выглядит собранный механизм клик-кляк
Внешне диван с механизмом клик-кляк выглядит как простой конструктор из сиденья и спинки. Однако на самом деле у каждой подобной модели дивана есть 4 дополнительных секции, выполняющие роль боковин и подлокотников. Большинство изделий оборудовано вместительным бельевым ящиком.
Механизмы клик-кляк бывают трех- и четырехступенчатыми. При этом по дизайну мебель практически не отличается, но процесс трансформации в спальное место и обратно будет немного разниться.
Ограничений по установке механизма клик-кляк в диваны практически нет, поэтому на рынке представлен большой модельный ряд, различающийся в первую очередь по габаритам.
Читайте также
Как правильно выбрать цвет дивана?- Детский диван — самый компактный из возможных. Ширина собранной конструкции ~130 см, при этом разбираются исключительно подлокотники. Место для сна получается 180-200 см на 80-90 см. Подходит для детей, либо одиноких гостей, оставшихся на ночь.
- Средний размер. Ширина сложенного — 120-140, в разобранном виде: 140-160 на 190-200 см. Подойдет для ежедневного сна взрослого или подростка. В маленьких квартирах заменит двуспальную кровать.
- Самый большой диван клик-кляк составит конкуренцию стандартной кровати для двоих, габариты места отдыха при раскладке достигают 180-200*210 см. Часто используется в гостиных однокомнатных квартир и студий.
Виды и их особенности
Наибольшим спросом пользуются прямые модели: они компактные и функциональные. Прямые диваны могут состоять как из спинки и сиденья, так и дополняться регулируемыми подголовниками и подлокотниками. Если ищете максимально компактную модель с вместительным местом для сна — выбирайте второй вариант механизма.
Сложенные подлокотники уменьшают ширину дивана, а разобранные — увеличивают длину получившейся кровати.
Угловые диваны в большинстве случаев состоят из 3 секций, при этом центральная (сам угол) статична, а две крайние раскладные. Главное неудобство в данном случае создает именно угловой модуль. Так как сиденье рядом раскладывается, а спинка угла остается на месте, спать может быть не слишком комфортно.
Плюсы и минусы
Клик-кляк имеет большое количество преимуществ:
Читайте также
15 лучших идей для оформления стены в гостиной над диваном- Экономичность. Цена в случае клик-кляк зависит больше от обивки и наполнителя, чем от самой системы трансформации. Стандартная модель обойдется не дороже бюджетной «книжки».
- Многофункциональность. В то время, как большинство диванов имеют только два положения, у клик-кляка их 3. К классическим «сидя» и «лежа» добавляется промежуточное «полулежа». Последний режим удобен для отдыха после работы, просмотра фильмов, чтения книг.
- Комфорт. Сидеть на диване клик-кляк удобно, благодаря высокой спинке. А лежать — благодаря матрасу во всю длину и ширину изделия.
- Прочность. Механизм клик-кляк хоть и имеет множество шевелящихся деталей, все же относится к надежным и долговечным вариантам, подходящим для ежедневного сна.
- Универсальность. Диван заменяет сразу 2 изделия: сиденье днем и кровать ночью. Подходит для детских комнат, гостиных, кухонь, кабинетов.
- Простота ухода. Большинство производителей дополняют диваны съемными чехлами, что значительно упрощает уборку. Чехлы легко снимаются, чистятся или стираются. Это также избавит от необходимости менять обивку после ремонта: достаточно купить новый чехол в подходящем оттенке.
- Вариативность. Модели отличаются друг от друга не только размерами, но и формой: бывают прямые, угловые и даже п-образные диваны.
- Легкость трансформации. Расправить диван сможет даже ребенок, поэтому смело покупайте подобную модель в детскую.
Спорным моментом остается внешний вид дивана: кто-то считает дизайн устарелым, кто-то — стильным и современным. Одно точно: механизм клик-кляк подойдет не под каждый стиль интерьера.
В процессе эксплуатации могут выявиться недостатки:
- Мебель обязательно отодвигать от стены. Из-за особенностей разборки спинке нужно место сзади для принятия лежачего положения.
- У каждого механизма есть ограничения по весу. Так как каркасы производят различные фабрики из различных материалов, выдерживают они абсолютно разный вес — обязательно уточняйте перед покупкой.
- Зазор между половинками. Хоть клик-кляк и считается более цельным, в отличие от книжки, зазор между спинкой и сиденьем все равно присутствует — это особенность механизма. Чтобы решить проблему можно положить сверху тонкий ортопедический матрас, который днем будет храниться в ящике для белья под сиденьем.
Как раскладывается?
Мы уже говорили, что разложить диван клик-кляк сможет даже ребенок. Главное — правильная последовательность действий.
Пошаговая инструкция
Чтобы понять, как раскладывается диван, следует знать, что менять положение могут:
Читайте также
Покрывало на диван: виды, дизайн, цвета, ткани для накидок. Как красиво расположить плед?- спинка;
- подлокотники;
- ушки.
Раскладка
- Возьмитесь за поднятый подлокотник, находясь на диване. Потяните наверх до упора (услышите 2-3 щелчка) и опустите вниз.
- Проделайте первый шаг с боковиной спинки и второй стороной дивана.
- Держа сиденье снизу нужно приподнять наверх до того момента, пока спинка не опустится в горизонтальное положение и надавить до 2 щелчков. Затем опустить сиденье до образования ровной поверхности.
Ваш диван полностью разложен и готов ко сну! Но производителями предусмотрена интересная дополнительная функция, повышающая удобство пользования. Возьмитесь за подголовник и поднимите наверх (обычно есть 2-3 доступных положения). Лежа на таком изголовье удобно читать или смотреть телевизор.
Сборка
Чтобы сложить диван потребуется повторить все шаги в обратном порядке.
- Поднимите сиденье до 2 щелчков, опустите на место — спинка поднимется автоматически.
- Поднимите и защелкните подлокотники, при необходимости заверните «ушки».
Существует также положение «полулежа», когда спинка находится под углом 40-45 градусов к сиденью. Для этого сиденье нужно приближать к спинке не на 2, а на 1 щелчок.
Видео
Увидеть диван кляк-кляк на фото может быть недостаточно, чтобы составить полную картину особенностей. Чтобы узнать характеристики модели и увидеть все возможные положения сборки-разборки механизма, смотрите видео:
youtube.com/embed/IR9EK2yEh4k» allowfullscreen=»allowfullscreen»/>
Что учесть при выборе?
Читайте также
Как отмыть диван от пятен?Приобретая диван для личного пользования обратите внимание в первую очередь на качество рамы: от нее зависит срок службы и максимальный вес, который модель может выдержать. Чем прочнее — тем лучше.
Второй важный нюанс — обивка. Классические мебельные ткани — рогожка, велюр, флок, шенилл, жаккард — имеют свои достоинства и недостатки. Обязательно изучите свойства каждой, чтобы понять подходит она или нет. Например, на рогожке животные могут оставлять затяжки. А велюр или флок из-за ворсистости буквально притягивает шерсть и волосы питомцев.
Последний аспект — наполнение. Диваны бывают с пружинами (зависимыми и независимыми) и без них. В первом случае выбирайте независимый блок пружин средней или повышенной жесткости. Во втором — качественный ортопедический пенополиуретан, покрытый более мягким слоем из материала с эффектом памяти.
Примеры в интерьере
Клик-кляк, как уже было сказано, подходит не для каждого дома. Например, в классическом или роскошном доме в стиле барокко мебель такой формы будет смотреться неуместно. Зато в современных стилях, в том числе минимализме, диван займет почетное место.
При выборе следуйте правилу соразмерности. Компактные модели для маленьких комнат, вместительные угловые — для больших. Если в хозяйстве уже есть небольшой диванчик, который нужно поставить в просторную гостиную, дополните композицию одним или двумя креслами с таким же механизмом.
Совет напоследок: обязательно попробуйте самостоятельно собрать и разобрать механизм в магазине. Это поможет понять сможете ли повторять процедуру регулярно: утром и вечером.
lukemiller.org »Архив блога» Анализ вестерн-блотов с помощью Image Studio Lite
Image Studio Lite — это бесплатный пакет программного обеспечения от LI-COR Biosciences, предназначенный для ученых-биологов, которые хотят анализировать гели, вестерн-блоты, дот-блоты и другие аналогичные лабораторные результаты. Хотя Lite-версия бесплатна, существует более полная платная версия программного обеспечения, цель которой — легко интегрироваться с устройством, которое также продает Licor. Однако бесплатной Image Studio Lite более чем достаточно для базового анализа вестерн-блотов, как я покажу ниже.
Очевидно, вам нужно начать с загрузки и установки Image Studio Lite. При первом запуске программы после установки она предложит вам указать папку на диске, где будет храниться содержимое ваших анализов (рисунок 1). Он будет хранить копии ваших изображений, а также журналы выполняемых вами операций. Это в значительной степени способствует воспроизводимости любого выполняемого вами анализа, поскольку в нем будут храниться все дорожки, метки и другие элементы, которые вы рисуете на своих изображениях, вместе с рассчитанными значениями.
Рисунок 1. Начните с указания места для сохранения рабочих файлов, настроек и так далее.
После этого небольшого отклонения перед вами откроется главное окно Image Studio (рис. 2).
Рисунок 2. Основная рабочая область.
Первая задача — загрузить изображение вестерн-блота. В левом верхнем углу экрана вы найдете логотип Image Studio. Нажмите на нее, и вы увидите меню, полное опций (подобно тому, как последние версии Microsoft Office скрывают пункты меню за логотипом).Перейдите в Импорт> Другое изображение (рисунок 3). Следуйте диалогу выбора файла, чтобы открыть ваше изображение. В этом случае я открою tiff-изображение, созданное из отсканированного фрагмента рентгеновской пленки, полученного с помощью вестерн-блоттинга.
Рисунок 3. Импортируйте изображение для анализа.
В первый раз, когда я загрузил свое изображение в формате tiff, меня встретил слегка вызывающий панику черный шарик, показанный ниже (рис. 4). Это не было похоже на мое исходное изображение, но я думаю, это потому, что Image Studio пыталась угадать наилучшую настройку дисплея и просто упустила.
Рис. 4. Во время первоначального импорта цвета на моем изображении получались нечеткими, но это легко исправить, щелкнув значок руки справа под ползунками яркости и контрастности.
Это легко исправить и иллюстрирует один из удобных вариантов Image Studio Lite. Нажмите на маленький значок руки у правого края главного окна, под ползунками яркости и контрастности. Это вызывает следующее окно Display Image (Рисунок 5), в котором показаны несколько различных версий исходного изображения.Цель состоит в том, чтобы позволить вам выбрать такую настройку дисплея, которая упростит поиск ваших полос. Я выбрал верхнее центральное изображение. Если вы столкнетесь с ситуацией, когда ваше конкретное изображение не открывается правильно даже с этими параметрами настройки, вы можете связаться со службой поддержки LI-COR, чтобы они могли определить, как лучше всего приспособить ваш формат изображения (поддержка Licor: http: // www. licor.com/contact/
Рис. 5. Вам предлагается несколько вариантов, как лучше всего отобразить изображение.
После нажатия на верхнее центральное изображение открывается второе окно настройки дисплея (рис. 6). Здесь вы можете дополнительно настроить отображение изображения, выбрав одну из настроенных версий, которые сдвигают сигнал, фон или средние тона изображения. Важно отметить, что выбор, который вы делаете здесь (и в предыдущем окне Display Image), влияет только на то, что вы видите на экране, они не изменяют базовые данные в файле изображения. Цель состоит в том, чтобы упростить вам поиск и идентификацию полос на глаз, но необработанные числа, которые вы получаете из пикселей во время анализа, не изменятся.
Рисунок 6. В следующем окне вы можете дополнительно настроить отображение изображения.
Вернувшись в главное окно Image Studio, изображение вестерн-блота теперь отображается правильно. В данном случае я работаю с tiff-изображением вестерн-блоттинга, которое было отсканировано цифровым способом с куска рентгеновской пленки, потому что я олдскульный или просто старый. Вы можете работать с модным изображением, полученным с помощью лазерного сканера, или с цифровым изображением, полученным с помощью гелевой камеры, но концепции аналогичны. Мой пример блота (вот копия исходного файла) включает образец белка Hsp70 человека, приобретенный у коммерческого поставщика, который я использовал в качестве стандарта для образцов в крайнем левом ряду этого проекта.Остальные дорожки представляют собой образцы Hsp70 из каменистых литоральных водорослей, которые подвергались различным уровням теплового стресса.
Следующим шагом является переключение на вкладку «Фигуры» в верхней части главного окна Image Studio. Эта вкладка предоставляет инструменты для выбора полос, которые вы хотите проанализировать. Я использую базовую кнопку «Нарисовать прямоугольник». Есть дополнительные параметры, такие как автоматическое добавление прямоугольника, но я все время обнаруживаю, что мне приходится вручную настраивать автоматические прямоугольники, поэтому проще начать с настраиваемого прямоугольника.Я рисую первый прямоугольник, достаточно большой, чтобы охватить полосу в первой полосе, но также удостоверяюсь, что она будет достаточно большой, чтобы покрыть ту же полосу на любой из оставшихся полос (рис. 7).
Рис. 7. Используя кнопку «Нарисовать прямоугольник» на вкладке «Фигуры», я рисую прямоугольник, ограничивающий первую полосу. Этот прямоугольник достаточно большой, чтобы полностью охватить любую из последующих полос, которые я выделил.
На этом этапе вы можете захотеть увидеть, какие значения отображаются для выделенной полосы.Во-первых, вы можете увидеть график профиля полосы, щелкнув вкладку «Профили» в дальнем правом углу главного окна. Это показывает визуальное представление среза вашего прямоугольника. Во-вторых, вы должны щелкнуть вкладку «Фигуры» в самом низу главного окна (рисунок 8). Это показывает несколько столбцов чисел для выделенного вами диапазона.
Рис. 8. Щелкните вкладку Фигуры внизу экрана, чтобы увидеть числовые результаты для вашего прямоугольника.
Затем я переключаюсь на кнопку «Добавить выделение» на вкладке «Фигуры».Возвращаясь к изображению, достаточно просто один раз щелкнуть по следующему бэнду, который я хочу поместить в рамку, и Image Studio Lite поместит рамку такого же размера на изображение (рисунок 9). Возможно, вам придется немного щелкнуть и перетащить рамку, чтобы она располагалась по центру ленты.
Рисунок 9. Кнопка «Добавить выделение» позволяет сделать копию вашего первого поля и разместить ее в том месте, где вы щелкнули мышью. Новое поле можно щелкнуть и перетащить в его окончательное положение.
Повторите этот процесс, нажимая на каждую последующую полосу с помощью инструмента «Добавить выделение», и вы быстро покроете каждую полосу прямоугольником одинакового размера.Данные для каждого диапазона будут отображаться в нижней части главного окна по мере их добавления (рисунок 10).
Рисунок 10. Теперь все диапазоны выбраны.
Для этого базового анализа меня интересует столбец «Сигнал». Вы заметите, что все мои ценности отрицательные. Это просто функция того, как программа работает со значениями серого, хранящимися в моем tiff. Если вы имеете дело с изображением геля, на котором полосы светлее фона, ваши значения должны быть положительными.В любом случае, важным моментом является то, что полосы с более высокой плотностью и большим количеством белка в них имеют более высокие абсолютные значения (в моем случае очень отрицательные). Между прочим, если ваши яркие полосы возвращаются со значением Infinity, это означает, что ваше изображение с пятнами было переэкспонировано. См. Это объяснение того, почему это должно вас беспокоить и что делать с передержкой.
Используя значения необработанного сигнала, я могу теперь рассчитать относительную плотность всех полос образца относительно моего стандарта образца Hsp70 человека.Для начала вы можете просто выделить все строки данных на вкладке «Фигуры» в нижней части окна, скопировать их и вставить в Excel. Кроме того, вы можете перейти на вкладку «Таблица» и нажать кнопку «Запустить электронную таблицу», в результате чего будет создан и открыт новый файл Excel с вашими данными (рисунок 11).
Рисунок 11. Вы можете нажать кнопку Launch Spreadsheet, чтобы создать и открыть новую электронную таблицу Excel, содержащую данные вашего сигнала.
Я нормализую все по образцу стандарта человеческого Hsp70 в первой полосе, разделив каждое значение сигнала на значение сигнала в первой строке (рисунок 12).
Рис. 12. Открыв данные сигнала в Excel, вы можете рассчитать относительный сигнал для каждого образца по сравнению со стандартным образцом (в данном случае мой образец 1).
После расчета относительной плотности для каждой строки, используя строку 1 в качестве стандарта, у меня есть набор значений относительной плотности для каждой полосы на других дорожках (рисунок 13). Как и следовало ожидать, полоса на дорожке 6 очень близка к 1,0, так как она такая же темная, как и стандарт, а образец на дорожке 2 очень близок к нулю, поскольку это очень слабый сигнал.Для этих значений нет единиц измерения, это просто проценты относительно стандарта. Если бы я использовал тот же стандарт для всех моих других блотов, чтобы нормализовать значения плотности внутри блота, я мог бы сравнить свои процентные значения для этого блота с процентными значениями для других блотов. Этот анализ — именно то, что я сделал в оригинальном учебнике по вестерн-блоту ImageJ, который я написал здесь.
Рис. 13. Рассчитанные плотности масштабированы относительно стандартного образца из дорожки 1. Как и следовало ожидать, очень темная полоса на дорожке 6 имеет значение, близкое к стандарту, тогда как слабые полосы имеют более низкие значения.
Это основные шаги для анализа простого вестерн-блоттинга с помощью Image Studio Lite. Если вы нажмете значок «Сохранить» в строке меню ImageStudio, все ваши текущие данные анализа будут сохранены вместе со всеми изменениями, которые вы внесли в изображение, чтобы его было легче просматривать. В этом заметная сила Image Studio Lite, поскольку вы можете вернуться к сохраненному анализу через несколько месяцев и посмотреть, что вы сделали, чтобы получить свои цифры. В программе есть много других опций, некоторые из которых я расскажу ниже, и, конечно же, дополнительную информацию можно найти в файлах справки программы.
Дополнительная информация
Коррекция фона
Опции коррекции фонового шума заслуживают более подробного изучения.
По умолчанию Image Studio Lite выполняет коррекцию фона для учета плотности фона, присутствующей в вашем изображении. Если вы чрезмерно экспонируете гель или пятно, будь то на сканере или просто на рентгеновской пленке, начнет появляться фоновый шум, который повлияет на показания ваших полос. Теперь, если фоновый шум постоянен по всему блоту, он не должен существенно влиять на ваши показания плотности, поскольку каждая полоса будет смещена на одинаковую величину.Но если у вас разные уровни фонового шума на ваших полосах движения, вам подойдет какой-нибудь метод компенсации фонового шума.
Метод Image Studio по умолчанию заключается в том, чтобы определить узкую полосу за пределами формы выделения (прямоугольники, которые мы нарисовали ранее) и использовать пиксели в этой узкой полосе для определения фонового сигнала (рисунок 14).
Рисунок 14. По умолчанию Image Studio Lite будет использовать узкую полосу вокруг прямоугольника выделения для расчета фонового сигнала. Более темный внутренний прямоугольник — это исходный прямоугольник выделения, который я нарисовал, более тонкая внешняя линия показывает размер области выборки фона.
На вкладке «Фигуры» в разделе «Фон» вы можете настроить способ расчета этой коррекции фона: среднее или медианное значение пикселей в полосе (рисунок 15).
Рисунок 15. В разделе «Фон» вкладки «Фигуры» можно выбрать способ корректировки фона.
В качестве альтернативы вы можете выбрать «Нет» для коррекции, в результате чего в области результатов останется только столбец «Всего», поскольку столбец «Сигнал» изменится на NaN без коррекции фона.Если вы откажетесь от коррекции фонового шума, выбрав вариант «Нет», вы просто воспользуетесь значениями в столбце «Всего» для расчета относительной плотности. (Это общее значение работает для изображений, где полосы светлее фона, но не работает с конкретным изображением, которое я использую здесь, где полосы темнее фона.)
Когда вы переключаетесь между Медианной и Средней коррекцией фона, появляется диалоговое окно с просьбой выбрать, как вы хотите настроить границу пикселей (Рисунок 16). Вы можете выбрать ширину границы и выбрать, нужно ли учитывать все 4 стороны границы или только верхнюю / нижнюю или правую / левую стороны. Эта настройка будет удобна, если у вас есть гели, где соседние полосы очень близко друг к другу и будут выходить за пределы области границы фона вокруг вашего выделения. Всегда следите за тем, что находится в области границы фона, поскольку вы не хотите, чтобы соседняя полоса влияла на показания полосы, которую вы пытаетесь измерить.
Рисунок 16.Когда вы изменяете коррекцию фона между Медианной и Средней, вы можете изменить размер и ориентацию области коррекции фона.
Четвертая опция в разделах «Фигуры»> «Фон» — «Определяется пользователем». С помощью определяемой пользователем опции вы можете нарисовать произвольную фигуру где-нибудь на изображении, и пиксели внутри этой фигуры будут использоваться для расчета фонового сигнала для каждой другой фигуры, которую вы размещаете на изображении. Чтобы использовать опцию, определяемую пользователем, вы должны сначала нарисовать фигуру на изображении и установить ее над областью, которую вы хотите использовать в качестве образца фона (рисунок 17).
Рис. 17. Для определяемой пользователем коррекции фона начните с рисования выделенной формы в области, в которой вы хотите представить фоновый шум для всего изображения.
На рисунке выше (Рисунок 17) я нарисовал небольшой прямоугольник сразу за пределами области, где я хочу измерить диапазон. Затем я нажимаю кнопку Assign Shape, и появляется следующий диалог (рисунок 18):
Рисунок 18. Вы получите небольшое сообщение с вопросом, действительно ли вы хотите это сделать.Об этом, безусловно, стоит подумать, потому что довольно часто выбор одной небольшой области для отображения всех вариаций фонового шума на вашем изображении будет плохим выбором.
Нарисованный мной прямоугольник затем используется для расчета фонового сигнала. Значение фонового шума будет удалено из всех последующих полос, которые я измеряю. Как уже было показано выше (рисунки 8–13), основная процедура анализа состоит в том, чтобы затем нарисовать прямоугольник вокруг полосы и сделать этот прямоугольник достаточно большим, чтобы он охватил любые другие полосы, которые вы хотите измерить. Вы хотите, чтобы площадь, выделенная вокруг каждой полосы, между полосами была постоянной, чтобы вы измеряли одинаковую общую площадь. После рисования первого прямоугольника вы можете нажать кнопку «Добавить выделение» на вкладке «Фигуры» и щелкнуть, чтобы разместить каждый из других прямоугольников над полосами, которые вы хотите измерить. Результат выглядит как на рисунке 19:
.Рис. 19. После определения образца фона я поместил прямоугольник постоянного размера над каждым из моих реальных диапазонов образца.
В данном случае прямоугольник моего фонового образца — это образец 1, и он указан как Фон в столбце Тип.Остальные 7 значений — это семь полос на моих дорожках. Поскольку мы используем функцию коррекции фона в Image Studio Lite, мы будем использовать значения сигнала для расчета относительной плотности полос. Напоминаем, что мои значения сигнала здесь отрицательные, потому что мои значения с высокой плотностью темнее фона. Если ваши полосы с высокой плотностью светлее фона, ваши значения сигнала будут положительными.
Расчет относительной плотности семи полос образца такой же, как указано выше.Самый быстрый способ — перейти на вкладку «Таблица» и нажать кнопку «Запустить электронную таблицу», чтобы создать и открыть новую электронную таблицу Excel, содержащую данные. В новом столбце разделите сигнал для этой строки на значение сигнала для стандартной полосы образца (рисунок 20). На рисунке ниже моим стандартным образцом является строка 2 и (поскольку строка 1 st была коррекцией фона). Я делю все свои значения сигнала на значение сигнала моего эталона, как показано в столбце K.
Рисунок 20.Рассчитайте относительную плотность полос образца, используя стандарт для образца для нормализации значений.
Полученные значения представляют собой относительные плотности каждой полосы по отношению к стандарту образца в дорожке 1 моего блота (2 и строка значений в электронной таблице, рисунок 21). Обратите внимание, что я ничего не сделал со значением Background в электронной таблице, потому что его значение уже было учтено в значениях Signal, созданных Image Studio Lite.
Рисунок 21.Относительные плотности показаны в столбце K. Стандарт образца имеет значение 1, а все остальные значения выражены относительно стандарта образца.
Аннотация
Image Studio Lite предоставляет вам набор инструментов для вставки текстовых меток и стрелок на ваше изображение. Вы можете найти это полезным, например, для создания вывода для публикации.
Рисунок 22. Вкладка Аннотация.
На вкладке «Аннотация» (рис. 22) вы найдете несколько вариантов для вставки и изменения внешнего вида этикеток.Для начала в крайнем левом углу вкладки вы найдете раскрывающиеся меню, в которых можно выбрать шрифт, размер и цвет надписей, добавляемых к изображению (рис. 23).
Рис. 23. Используйте раскрывающиеся меню, чтобы установить шрифт, размер и цвет объектов аннотации, которые вы будете размещать на своем изображении.
Затем вы можете использовать кнопку «Добавить текст» на вкладке «Аннотация», чтобы начать вставку меток для полос движения. У вас будет возможность изменить расположение, размер и точный текст после размещения текста.
Рисунок 24. Вставка первой текстовой метки.
На рисунке 24 выше я обозначил свою первую полосу как стандарт. Первоначально вокруг текста будет пунктирная рамка, но это просто для того, чтобы сообщить вам, что этот фрагмент текста теперь выделен, и вы можете перетащить его туда, где вам нужно. Пунктирная рамка исчезнет, как только вы создадите другой фрагмент текста или выберете что-то еще. Если кнопка «Добавить текст» все еще активна, вы можете щелкнуть в новом месте и ввести следующую метку.Когда я закончил маркировку, мой блот выглядел, как на рис. 25:
.Рисунок 25. Все метки дорожек размещены.
В целях публикации мне не обязательно нужны эти желтые коробки и ярлыки, мне нужны только ярлыки дорожек. Однако, если вам нужна копия для лабораторной записной книжки, вы можете оставить все себе. Чтобы выбрать отображаемые объекты, вернитесь на вкладку «Фигуры». Там вы найдете раздел «Показать» с флажками для управления отображаемыми объектами (рис. 26).
Рисунок 26. На вкладке «Фигуры» вы можете выбрать, какие аннотации и формы вы хотите видеть в любой момент времени.
Вы можете снять флажки для форм, меток, количественного определения и локального фона, оставив отмеченным только текстовое поле. Тогда изображение будет выглядеть, как на Рисунке 27.
Рис. 27. Мое изображение с отключенными формами, метками, локальным фоном и количественной информацией. Текстовая информация остается.
Если вы перейдете к значку Image Studio Lite в верхнем левом углу, вы найдете параметр «Экспорт текущего изображения» (рис. 28).
Рисунок 28. Под значком Image Studio вы найдете параметры для экспорта измененного изображения.
Когда вы выберете эту опцию, появится диалоговое окно, в котором вы сможете указать выходной формат вашего изображения (Рисунок 29). Большинство журналов запрашивают изображение TIFF с высоким разрешением (300 или 600 точек на дюйм), когда вы отправляете им файлы изображений, такие как этот вестерн-блот. Если вы просто хотите опубликовать небольшое изображение в Интернете и добавили к нему аннотации, вариант PNG даст гораздо более чистый результат, чем вариант JPEG.72 dpi достаточно для веб-изображений.
Рисунок 29. При экспорте изображения вам предоставляются параметры для настройки качества выходного изображения.
Вы также можете решить, что хотите вырезать кучу лишнего места на пятне. Вы можете сделать это на вкладке «Изображение» в Image Studio, но помните о двух различных параметрах кадрирования (рис. 30).
Рисунок 30. На вкладке «Изображение» есть параметры для обрезки изображения. Кнопки в поле Crop Marks будут применять изменения только при экспорте изображения, в то время как кнопка Crop в разделе Create обрежет изображение и создаст новую копию (отбросив существующий анализ).
В разделе «Создать» вы найдете кнопку «Обрезать», но при этом будет создана совершенно новая версия исходного изображения, без анализа и аннотаций (они останутся в исходной версии изображения в Image Studio Lite). На самом деле вам нужны кнопки в разделе Crop Marks. Нажмите «Изменить», появится пунктирная рамка, которую можно щелкнуть и перетащить, чтобы определить область изображения, которую вы хотите сохранить (рис. 31).
Рис. 31. После нажатия кнопки «Изменить» на вкладке «Изображение» вы можете перетащить область обрезки, чтобы она соответствовала только тем частям изображения, которые вы хотите сохранить в экспортированном файле изображения.
Затем нажмите кнопку «Применить», чтобы она была выделена в разделе «Метки кадрирования» на вкладке «Изображение», и ваш кадрирование будет создано. Изображение, над которым вы сейчас работаете, не будет обрезано на экране, но когда вы перейдете в Экспорт изображения, будет использоваться только обрезанный раздел, а ваши аннотации будут включены в выходное изображение, как показано на рисунке 32.
Рис. 32. Экспортированное обрезанное изображение с моими аннотациями для каждой полосы.
StarrLab — презентации вестерн-блоттинга
Представляя вестерн-блот на совещании или презентации лаборатории Старра, включите следующую информацию:
Название: Дата, белок (белки) и клеточные лизаты, включая анализируемые условия.
Подзаголовок: Ваши инициалы и дата, подробные сведения о которых можно найти в лабораторной книге (см. Сведения о лабораторной книге).
Исходные изображения блотов
- Эскизы полных изображений блотов
- Имена файлов исходных изображений на машине Proteinimple
Изображение блота, используемое для денситометрических измерений
- Обозначьте каждую дорожку (необязательно: используйте номера и укажите номер ниже)
- Обозначьте размеры полос
- Обозначьте интересующие полосы с названием белка
- Обозначьте контрольную полосу с названием белка
График денситометрии
- Название: Описание эксперимента
- Ось X ярлыка: Клетки
- Метка, ось Y: Экспрессия белка относительно контрольного лизата , нормализованная к гену домашнего хозяйства .(замените слова, выделенные красным, на ваш конкретный эксперимент)
Подпись и выводы
- Подпись к рисунку: короткий абзац, описывающий метод вестерн-блоттинга.
- Рисунок вывод: Краткий абзац с вашими выводами.
Передача изображений в PowerPoint с помощью FIJI (ImageJ)
- Откройте изображение блота и изображение лестничной диаграммы и преобразуйте оба изображения в 8-битные (Изображение> Тип> 8-бит)
- Обычно инвертируйте изображение блота, чтобы полосы были черный, а фон белый (Правка> Инвертировать)
- Отрегулируйте как изображение пятна, так и изображение лестницы (Изображение> Настроить> Яркость / Контраст), чтобы они выглядели хорошо для вас
- Поверните изображения так, чтобы полосы были на горизонтальной линии (Изображение> Трансформировать> Повернуть), затем отрегулируйте Угол, пока полосы не станут горизонтальными.Используйте Grid Lines = 20, Билинейную интерполяцию и щелкните поле предварительного просмотра. Убедитесь, что оба изображения повернуты одинаково.
- Очистите все, что находится за пределами лестницы, на изображении лестницы, нарисовав прямоугольник вокруг дорожки лестницы, затем используйте Правка> Очистить снаружи
- Используя снимок экрана (shift-ctrl-command-4), сделайте снимок изображения лестницы и изображения пятна и вставьте их в PowerPoint.
- Чтобы разместить лестницу, вернитесь в FIJI и щелкните изображение пятна, затем наложите лестницу (Изображение> Наложение> Добавить изображение).Выберите изображение лестницы и установите непрозрачность ~ 75%. Это создаст изображение, которое позволит вам выровнять положение лестницы рядом с изображением блота в PowerPoint.
Ниже приведен пример хорошо представленного Вестерн-блоттинга
% PDF-1.6 % 1163 0 объект > endobj xref 1163 251 0000000016 00000 н. 0000007782 00000 н. 0000008020 00000 н. 0000008066 00000 н. 0000008199 00000 н. 0000009140 00000 н. 0000009280 00000 п. 0000009420 00000 н. 0000009809 00000 н. 0000010198 00000 п. 0000010313 00000 п. 0000010426 00000 п. 0000012114 00000 п. 0000013244 00000 п. 0000014531 00000 п. 0000016237 00000 п. 0000017642 00000 п. 0000018951 00000 п. 0000020551 00000 п. 0000022055 00000 п. 0000022091 00000 п. 0000022170 00000 п. 0000028496 00000 п. 0000028831 00000 п. 0000028900 00000 п. 0000029018 00000 н. 0000029132 00000 п. 0000029203 00000 п. 0000029297 00000 п. 0000049605 00000 п. 0000049877 00000 п. 0000067309 00000 п. 0000067338 00000 п. 0000067744 00000 п. 0000067773 00000 п. 0000068086 00000 п. 0000069480 00000 п. 0000069812 00000 п. 0000070184 00000 п. 0000071885 00000 п. 0000072245 00000 п. 0000072618 00000 п. 0000072738 00000 н. 0000072837 00000 п. 0000072987 00000 п. 0000073094 00000 п. 0000073186 00000 п. 0000073310 00000 п. 0000073460 00000 п. 0000073539 00000 п. 0000073743 00000 п. 0000073821 00000 п. 0000073938 00000 п. 0000076524 00000 п. 0000076565 00000 п. 0000077765 00000 п. 0000077832 00000 п. 0000077911 00000 п. 0000078036 00000 п. 0000078165 00000 п. 0000078280 00000 п. 0000078405 00000 п. 0000080319 00000 п. 0000080386 00000 п. 0000080465 00000 п. 0000080581 00000 п. 0000081123 00000 п. 0000081673 00000 п. 0000082086 00000 п. 0000086779 00000 п. 0000086820 00000 н. 0000087115 00000 п. 0000087178 00000 п. 0000087253 00000 п. 0000087362 00000 п. 0000087458 00000 п. 0000087639 00000 п. 0000087767 00000 п. 0000087900 00000 п. 0000088024 00000 п. 0000088152 00000 п. 0000088329 00000 п. 0000088473 00000 п. 0000088587 00000 п. 0000088729 00000 п. 0000088905 00000 н. 0000089050 00000 п. 0000089194 00000 п. 0000089356 00000 п. 0000089468 00000 п. 0000089571 00000 п. 0000089737 00000 п. 0000089849 00000 п. 0000089964 00000 н. 00000
00000 п. 00000 00000 п. 0000000000 п. 00000
00000 н. 00000 00000 н. 00000 00000 н. 0000000000 н. 00000 00000 п. 00000 00000 п. 0000091433 00000 п. 0000091544 00000 п. 0000091720 00000 н. 0000091847 00000 п. 0000092025 00000 п. 0000092137 00000 п. 0000092305 00000 п. 0000092452 00000 п. 0000092582 00000 п. 0000092756 00000 п. 0000092873 00000 п. 0000092981 00000 п. 0000093123 00000 п. 0000093261 00000 п. 0000093395 00000 п. 0000093527 00000 п. 0000093653 00000 п. 0000093783 00000 п. 0000093929 00000 п. 0000094027 00000 п. 0000094140 00000 п. 0000094252 00000 п. 0000094371 00000 п. 0000094491 00000 п. 0000094608 00000 п. 0000094722 00000 п. 0000094847 00000 п. 0000094978 00000 п. 0000095109 00000 п. 0000095274 00000 п. 0000095385 00000 п. 0000095504 00000 п. 0000095636 00000 п. 0000095755 00000 п. 0000095881 00000 п. 0000096005 00000 п. 0000096122 00000 п. 0000096250 00000 п. 0000096365 00000 п. 0000096470 00000 п. 0000096567 00000 п. 0000096731 00000 п. 0000096905 00000 н. 0000097019 00000 п. 0000097136 00000 п. 0000097254 00000 п. 0000097373 00000 п. 0000097515 00000 п. 0000097631 00000 п. 0000097752 00000 п. 0000097886 00000 п. 0000097996 00000 н. 0000098094 00000 п. 0000098212 00000 п. 0000098328 00000 п. 0000098445 00000 п. 0000098560 00000 п. 0000098675 00000 п. 0000098775 00000 п. 0000098872 00000 п. 0000099032 00000 н. 0000099138 00000 н. 0000099232 00000 н. 0000099390 00000 н. 0000099502 00000 н. 0000099613 00000 н. 0000099795 00000 п. 0000099918 00000 н. 0000100024 00000 н. 0000100198 00000 н. 0000100310 00000 н. 0000100429 00000 н. 0000100597 00000 н. 0000100693 00000 п. 0000100813 00000 н. 0000100935 00000 п. 0000101105 00000 п. 0000101208 00000 н. 0000101309 00000 н. 0000101438 00000 н. 0000101558 00000 н. 0000101718 00000 п. 0000101833 00000 п. 0000101963 00000 н. 0000102119 00000 п. 0000102231 00000 н. 0000102336 00000 п. 0000102466 00000 н. 0000102624 00000 н. 0000102737 00000 н. 0000102859 00000 н. 0000102975 00000 н. 0000103097 00000 п. 0000103213 00000 н. 0000103350 00000 н. 0000103477 00000 н. 0000103609 00000 н. 0000103727 00000 н. 0000103845 00000 н. 0000103998 00000 н. 0000104150 00000 н. 0000104269 00000 н. 0000104376 00000 п. 0000104493 00000 н. 0000104606 00000 н. 0000104732 00000 н. 0000104854 00000 н. 0000104980 00000 н. 0000105111 00000 п. 0000105215 00000 н. 0000105330 00000 н. 0000105461 00000 п. 0000105575 00000 п. 0000105713 00000 н. 0000105859 00000 н. 0000106011 00000 п. 0000106151 00000 п. 0000106332 00000 н. 0000106426 00000 н. 0000106547 00000 н. 0000106711 00000 н. 0000106833 00000 н. 0000106957 00000 п. 0000107090 00000 п. 0000107221 00000 н. 0000107348 00000 п. 0000107446 00000 н. 0000107567 00000 н. 0000107730 00000 н. 0000107837 00000 п. 0000107951 00000 п. 0000108093 00000 н. 0000108267 00000 н. 0000108361 00000 п. 0000108500 00000 н. 0000108618 00000 п. 0000108753 00000 п. 0000108892 00000 н. 0000109027 00000 н. 0000109162 00000 п. 0000109325 00000 н. 0000109446 00000 н. 0000109574 00000 п. 0000109702 00000 н. 0000109839 00000 п. 0000109992 00000 н. 0000110123 00000 п. 0000005316 00000 п. трейлер ] / Назад 9
5 >> startxref 0 %% EOF 1413 0 объект > поток hX {X? 3; ªDD @ x} J4`7 * V- ] bF1 # Hj! F) 4 (c; Yvo̝ {9;
Идентификация цели с помощью диазиринового фото-сшивания и химии щелчков
Дополнительные материалы
Ацетон, охлажденный до -20 ° C
1% SDS в PBS
Буфер для аффинной очистки (50 мМ Hepes, pH 7. 4; 100 мМ NaCl; 1% NP-40)
Гранулы мономерной авидин агарозы (Pierce)
Антитела против TAMRA (Invitrogen, номер продукта A6397)
Гранулы сефарозы протеина A (GE Healthcare)
Промывочный буфер (50 мМ Hepes, pH 7,4; 500 мМ NaCl; 1% NP-40)
Буфер для элюирования (2 мМ d-биотин; 1% NP-40; PBS)
Стрептавидин-конъюгированная пероксидаза хрена (strep-HRP)
Полиалломерные микроцентрифужные пробирки на 1,5 мл (Beckman -Coulter)
Настольная ультрацентрифуга
Звуковая водяная баня
Охлаждаемая микроцентрифуга
Вращающийся смеситель для пробирок
1.Выполните шаги 1-5 Основного протокола в 25-50-кратном масштабе (например, 0,7 мл общего белка 1 мг / мл).
Полный набор контрольных экспериментов, описанных в Основном протоколе, здесь не требуется, если они ранее проводились в экспериментах аналитического масштаба.
Во время увеличения масштаба можно использовать сосуд большего размера, например лунку 12- или 24-луночной чашки для тканевых культур на этапе облучения. Для правильного облучения важно, чтобы весь образец находился в пределах границ падающего света (круг диаметром ~ 6 см при использовании описанной здесь лампы).1-минутного облучения 0,7 мл образца в лунке 24-луночной чашки, как здесь используется, достаточно для полной фотоактивации диазирина. Для объемов образцов, значительно превышающих 0,7 мл, может потребоваться более длительное время облучения, одновременное перемешивание образцов или облучение партиями. Небольшая аликвота смеси может быть удалена и проанализирована с помощью SDS-PAGE после химического анализа для определения степени сшивания.
2. После облучения перенесите смесь, содержащую микросомы ER, в 1.Полиалломерная микроцентрифужная пробирка объемом 5 мл и осаждение микросом в настольной ультрацентрифуге при 50000 × g в течение 10 минут.
Седиментация концентрирует микросомы и позволяет проводить щелчок в меньшем объеме. Для других типов белковых смесей, которые не могут быть сконцентрированы путем осаждения, другие методы осаждения белков могут быть протестированы в пилотных экспериментах, или смесь может быть непосредственно подвергнута химической химии.
3. Аспирируйте супернатант и повторно суспендируйте микросомы в 97.5 мкл PBS.
4. Выполните шаги 7–10 Базового протокола, увеличивая объемы щелкающих реагентов в соответствии с объемом повторно суспендированного осадка микросом. Для 97,5 мкл повторно суспендированных микросом добавьте 12,5 мкл 10% SDS, 2,5 мкл азида TAMRA ( 4 ) или биотиназида ( 5 ) и 12,5 мкл смеси катализаторов (см. Шаги 9 и 10 в Базовый протокол).
5. После щелчка удалите аликвоту 5 мкл, добавьте буфер для образца Лэммли, быстро заморозьте в жидком азоте и храните образец при -80 ° C.Сохраненный образец должен быть стабильным не менее одной недели при температуре –80 ° C.
Эта сохраненная аликвота представляет собой «вход» в аффинную очистку. На этом этапе обнаружение конкретных фото-сшитых белков можно определить с помощью SDS-PAGE (этап 14 основного протокола).
Аликвоту образца также можно разбавить в ~ 10 раз, чтобы снизить концентрацию SDS, и подвергнуть иммунопреципитации с использованием специфических антител, направленных против белков-кандидатов-мишеней.
6.К оставшемуся образцу (120 мкл) добавить 0,5 мл ацетона, охлажденного до -20 ° C, до ~ 80% (об. / Об.). Кратковременно перемешайте на вортексе и поместите при -20 ° C на 0,5 часа.
Должен образоваться белый осадок, содержащий осажденные белки. Осаждение холодным ацетоном удаляет большой молярный избыток свободного TAMRA-азида ( 4 ) или биотин-азида ( 5 ), который может мешать связыванию с TAMRA-антителом или шариками мономерного авидина, соответственно. Азидная метка растворима в ацетоне, а белки — нет, что позволяет их разделить.
После добавления холодного ацетона образец можно также хранить в течение ночи при –20 ° C.
7. Осаждение осажденного белка в микроцентрифуге при 20 000 × g в течение 10 минут при 4 ° C.
На дне пробирки должен наблюдаться белый осадок, содержащий осажденный белок.
8. Аспирируйте супернатант и добавьте 0,5 мл холодного ацетона.
10. Используйте водяную баню для обработки ультразвуком для разрушения и диспергирования осажденного белкового осадка в ацетоне.
Старайтесь не нагревать образец во время обработки ультразвуком.
11. Верните образец к температуре –20 ° C на 10 минут.
Более длительное время инкубации при -20 ° C может улучшить извлечение осажденного белка.
12. Повторите шаги 7-11 еще два раза.
Важно удалить все следы свободного TAMRA-азида ( 4 ) или биотин-азида ( 5 ) для максимального выхода аффинно очищенных белков.
13.Аспирируйте супернатант и высушите осадок на воздухе в течение ~ 10 минут при комнатной температуре.
Сушка на воздухе удаляет остаточный ацетон из белкового осадка. Не пересушивайте гранулы, так как они будут повторно растворены.
14. Добавьте к осадку 50 мкл 1% SDS в PBS и осторожно удалите осадок со стороны пробирки встряхиванием и / или обработкой ультразвуком.
Не используйте наконечник пипетки для удаления гранулы, поскольку гранула может прилипнуть к наконечнику.
SDS помогает повторно растворить белковый осадок.
15. После полного растворения осадка разбавьте образец 0,5 мл буфера для аффинной очистки.
SDS должен быть разбавлен до ≤ 0,1% для эффективной очистки на этапах 16-19. Моющее средство NP-40 помогает «замаскировать» SDS в смешанных мицеллах.
15. Удалите аликвоту 20 мкл смеси, добавьте буфер для образцов Лэммли, быстро заморозьте в жидком азоте и храните при -80 ° C. Образец должен быть стабильным не менее одной недели при температуре –80 ° C.
Этот образец можно использовать для оценки эффективности осаждения и повторной солюбилизации (этапы 6–14) путем сравнения с аликвотой реакции щелчка «ввода» (сохраненной на этапе 5).
16. Выполните шаги 16a-17a и 24a для белков, меченных TAMRA, выполните шаги 16b-17b и 24b для белков, меченных биотином.
16а. Уравновесить 30 мкл протеина А сефарозы в буфере для аффинной очистки и приготовить 50% суспензию в том же буфере.
16б. Приготовьте шарики мономерного авидина (Pierce) в соответствии с инструкциями производителя, уравновесьте с буфером для аффинной очистки и приготовьте 50% суспензию в буфере для аффинной очистки.
17а. Добавьте 30 мкл суспензии протеина А-сефарозы и 5 мкл антитела против TAMRA к повторно солюбилизированному осадку белка.
17б. Добавьте 50 мкл суспензии мономерной авидин-агарозы к повторно солюбилизированному осадку белка.
18. Инкубируйте образцы на смесителе с вращающейся трубкой в течение 3 часов при 4 ° C.
Образцы также можно инкубировать в течение ночи при 4 ° C.
19. Осаждение гранул агарозы при 10,000 × g в течение 1 минуты в микроцентрифуге и удаление супернатанта.
20. Сохраните аликвоту супернатанта объемом 20 мкл, добавьте буфер для образцов Лэммли, быстро заморозьте в жидком азоте и храните при -80 ° C. Сохраненный образец должен быть стабильным не менее одной недели при температуре –80 ° C.
Сохраненную аликвоту супернатанта можно использовать для оценки эффективности стадии аффинной очистки по сравнению с равной аликвотой повторно солюбилизированного осадка (сохраненной на этапе 15).
21. Добавьте 1 мл буфера для аффинной очистки к осажденным шарикам агарозы и вращайте на миксере для пробирок в течение 10 минут при 4 ° C.
Более длительное время перемешивания может быть более эффективным для удаления неспецифически связанных белков из агарозной смолы.
22. Повторите шаги 19-21 (супернатанты от промывок можно выбросить).
23. Повторите шаг 22 дважды, но замените буфер для аффинной очистки промывочным буфером.
24а. После последней промывки элюируйте связанные белки с помощью 50 мкл 1 × буфера для образцов Лэммли в течение 20 минут при комнатной температуре.
24б. После последней промывки элюируйте связанные белки 50 мкл буфера для элюции в течение 20 минут при комнатной температуре или в соответствии с инструкциями производителя.
Детергент NP-40 добавлен в буфер для элюирования, чтобы помочь сохранить белки в растворе после элюирования. При элюировании растворимых белков моющее средство может не потребоваться.
25. Разберите эквивалентные количества «входного» образца (сохраненного на этапе 5, 4,5 мкл), осадка повторно солюбилизированного белка (сохраненного на этапе 15, 20 мкл), надосадочной жидкости, очищенной после аффинной очистки (сохраненной на этапе 20, 20 мкл) и элюента (сохраненного на этапе 24, 1,8 мкл) с помощью SDS-PAGE. Сканируйте гель на предмет флуоресценции (шаг 14 основного протокола) или перенесите белки на нитроцеллюлозную или PVDF-мембрану и зонд со стрептавидином-HRP.
Сравнение интенсивности сигнала образцов «входящего» и повторно растворенного осадка показывает эффективность этапов осаждения ацетоном и повторной солюбилизации (этапы 6-15). Сравнение интенсивности сигнала повторно солюбилизированного осадка с надосадочной жидкостью, очищенной после аффинной очистки, указывает на эффективность понижения (стадии 16-19). Сравнение интенсивности сигнала повторно солюбилизированного осадка с элюентом указывает на извлечение меченых белков (этапы 21-24).
Оптимизация вестерн-блоттинга улучшает обнаружение и количественную оценку белка с низким содержанием
Улучшение обнаружения и количественной оценки белка с низким содержанием
Метод вестерн-блоттинга освещает молекулярные события, включая экспрессию белка, локализацию белка, белок-белковые взаимодействия или посттрансляционные модификации (PTM).Эти молекулярные события часто очень незаметны. Например, в рамках индивидуального сигнального пути только определенный процент молекул может подвергнуться PTM. Таким образом, обнаружение белков с низким уровнем экспрессии является общей проблемой для исследователей. Чтобы помочь вам оптимизировать как обнаружение, так и количественную оценку таких белков, а также общее качество окончательного изображения вестерн-блоттинга, мы собрали полезные советы для следующих шагов:
- Базовые приготовления
- Гель / Трансфер / Блокировка
- Первичное антитело
- Обнаружение сигнала
- Резюме / Дополнительная литература
Подготовка проб
Первоначальные улучшения в обнаружении и количественной оценке белков с низким содержанием могут быть сделаны на стадии подготовки образца. Есть несколько шагов для максимального извлечения целевого белка из образца.
Буферы для лизиса
Лизис — это процесс, при котором клеточная мембрана разрушается, и содержимое клетки повторно суспендируется в растворимой форме. Первичным активным агентом в буфере для лизиса является детергент, который может быть ионным или неионогенным. Самым известным из ионных детергентов является додецилсульфат натрия (SDS), в то время как неионные детергенты включают Tween, Triton X и NP-40. Ионные детергенты считаются более жесткими, чем неионные, из-за их способности влиять на структуру белка.В связи с этим часто рекомендуется их использование с антителами против денатурированных форм или синтетических пептидов целевого белка. Если требуется дальнейшая денатурация, можно использовать восстанавливающий агент (DTT или бета-меркаптоэтанол) для разрыва связей S-S. Неионные детергенты вызывают меньшую денатурацию белка, поэтому, если их использование часто рекомендуется с первичными антителами, вырабатываемыми против нативных белков. Использование правильного буфера для лизиса улучшит обнаружение низкого содержания целевого белка.
Таблица 1.Буферы для лизиса
Буфер для лизиса | Моющее средство | Тип моющего средства | Отсек сотовой связи | Антитело иммуноген |
---|---|---|---|---|
RIPA | SDS | Ионный | Цитоплазматический, мембранный или ядерный | Денатурированный белок или пептид |
НП-40 | НП-40 | Неионный | Цитоплазматический | Неповрежденный белок |
Трис-Тришн | Тритон | Неионный | Цитоскелет | Неповрежденный белок |
При лизировании клетки или ткани используйте как можно меньше буфера для лизиса, чтобы максимально сконцентрировать образцы. Это позволит добавлять повышенное количество белка на лунку, повышая шансы обнаружения белка с низким содержанием. Однако обратите внимание, что использование недостаточного количества буфера для лизиса может привести к неполному лизису образца. Восстановление белка может варьироваться в зависимости от типа клеток и метода восстановления. Клетки HeLa содержат примерно 300 мкг на клетку. Типичные загрузочные количества белка, добавляемого в каждую лунку, колеблются от 10 мкг (~ 330 000 клеток) до 50 мкг (~ 1,650 000 клеток).
Таблица 2.Приблизительное восстановление белка (на основе клеток HeLa количество клеток будет варьироваться в зависимости от типа клеток).
Пластины | Прибл. Количество ячеек в конфлюэнтности | Объем буфера для лизиса | Прибл. Восстановление белка (мкг белка) |
---|---|---|---|
6-луночный | 1,200,000 | 200-400 | 360 |
12-луночный | 400 000 | 100-200 | 120 |
24-луночный | 200 000 | 50–100 | 60 |
Колбы | |||
Т-25 | 2 800 000 | 500 | 840 |
Т-75 | 8 400 000 | 1 мл | 2,520 |
Т-160 | 18 400 000 | 2. 5 мл | 5 570 |
Определение концентрации восстановленного белка
Существует три основных метода определения концентрации восстановленного белка. Все они являются колориметрическими анализами и могут использовать известные концентрации бычьего сывороточного альбумина (БСА) для построения стандартной кривой, по которой можно оценивать образцы.
Протеиновый анализ | Метод | Диапазон |
---|---|---|
Лоури | Реакция взаимодействия пептидных связей и меди в щелочных условиях с образованием Cu + . | 10-1000 мкг / мл |
Брэдфорд | В кислых условиях кумасси бриллиантовый синий G-250 связывается с белком | 1-20 мкг |
BCA | Восстановите Cu 2+ до Cu + , который связывается с белком | -0. От 5 мкг / мл до 1,5 мг / мл |
Восстановление белка из отдельных клеточных компартментов
Если целевой белок преимущественно экспрессируется в одном клеточном компартменте (мембране или ядре), то выделение белков из отдельного компонента увеличит шансы количественного определения. Для извлечения ядерных белков компания Bio-Rad предлагает набор для экстракции белков ReadyPrep ™ (цитоплазматический / ядерный). Антитело против ламина A / C (MCA1429GA / VMA00200) можно использовать в качестве маркера для дифференциации ядерных образцов от цитоплазматических.В дополнение к экстракции ядерного белка Bio-Rad предлагает наборы для экстракции белков, связанных с мембраной, а также белков цитозольной передачи сигналов.
Осаждение белков
Еще одна стратегия повышения уровня обнаружения специфического белка — это добавление соединения, такого как ацетон, которое вызывает осаждение белка. После центрифугирования осажденного белка до осадка супернатант удаляют, а осадок белка повторно растворяют в буфере для образцов. Одним из недостатков осаждения белков является то, что белки могут денатурировать, что затрудняет повторную солюбилизацию осадка.
Вернуться наверх
Гель-электрофорез / перенос / блокирование
Знание размера целевого белка укажет на гель, который следует выбрать, и условия для переноса. В целом компания Bio-Rad рекомендует свои готовые гели с трис-трицином Criterion ™ для небольших белков и готовые гели с трис-ацетатом Criterion XT для разделения белков с более высокой молекулярной массой (более подробную информацию см. В разделе ниже).
Гель-электрофорез
Выбор правильного геля для целевого белка может стать решающим шагом в оптимизации обнаружения и количественной оценки.Если целевой белок имеет низкую молекулярную массу, следует выбрать гель с высоким процентным содержанием, чтобы максимизировать разрешение белка. И наоборот, если целевой белок имеет высокую молекулярную массу, гель с низким процентным содержанием обеспечивает лучшее разрешение. На рис. 1 перечислены модели миграции белковых стандартов для предварительно отлитых гелей серии Criterion.
Стандарты неокрашенного белка Precision Plus
Рис.1. Паттерны миграции маркеров молекулярной массы на гелях Criterion Tris-tricine.
Изучение характера миграции маркеров молекулярной массы позволяет выбрать правильный гель для максимального разрешения целевого белка.
Перевод
Размер целевого белка также должен влиять на выбор используемого протокола переноса. Белки с меньшей молекулярной массой переносятся быстрее, чем белки с большей молекулярной массой. Если ваш целевой белок находится на большем конце шкалы (> 70 кДа), продлите перенос на столько, сколько рекомендуется. Однако не позволяйте процессу переноса продолжаться слишком долго, иначе белок будет потерян.Помимо времени переноса следует также учитывать тип мембраны. Существует два типа мембран: ПВДФ и нитроцеллюлоза. В случае обнаружения белков с низким содержанием белка рекомендуется выбрать PVDF из-за его большей связывающей способности.
Блокировка / Стирка
Блокирование мембраны требуется для устранения большого количества неспецифического связывания, которое могло бы происходить в ее отсутствие. BSA и повторно суспендированное сухое обезжиренное молоко обычно используются для блокирования неспецифического связывания с мембраной.Блокирующие агенты обычно суспендируют в забуференном Трис солевом растворе с детергентом Твин 20. Для обнаружения белка с низким содержанием белка может потребоваться снизить концентрацию используемого блокирующего агента (BSA или молоко). Блокирование часто выполняется с помощью BSA в концентрациях от 1 до 5%. В случае низкого содержания белков эту концентрацию можно уменьшить. Кроме того, уменьшение количества стирок или содержания твина в стирке также может увеличить сигнал.
Вернуться наверх
Первичные антитела
Оптимальная концентрация первичного антитела даст наивысший сигнал в линейном диапазоне от связывания целевого белка при минимизации неспецифического связывания. Первичное титрование антител — это процесс определения оптимальной концентрации антитела, необходимой для обнаружения целевого белка. Хотя большинство поставщиков антител рекомендуют конкретное разведение антитела, оно часто варьируется в зависимости от анализируемого образца. Поэтому рекомендуется проводить титрование первичных антител, специфичных для образца.
Начальная оптимизация / титрование антител
Если образцов и / или антител не хватает, то дот-блоты (грубые версии вестерн-блоттинга) являются полезным первым шагом в определении оптимального диапазона концентраций антител.Целевой белок или смесь клеточного лизата добавляют непосредственно на поверхность нитроцеллюлозной или PVDF-мембраны. Растворы белков можно применять непосредственно в небольшом объеме. Каждый дот-блот должен содержать известные количества целевого белка или клеточного лизата. В идеале следует проводить серии разведений белка, первичных и вторичных антител.
Рис. 1. Дот-блоттинг, показывающий титрование первичных антител, вторичных антител и концентрации лизата.
После высыхания дот-блоты подвергают тем же стадиям иммунодетекции, что и для вестерн-блоттинга, т.е.е. блокирование, инкубация антител и обнаружение мишени с субстратом. Серые и черные точки на рисунке выше указывают, какие образцы являются положительными для целевого белка и примерно соответствуют полосам, полученным при вестерн-блоттинге. Выбор точки с наивысшим сигналом дает отправную точку для проведения дальнейших экспериментов по титрованию вокруг этой концентрации. Однако эти методы не предоставляют информации о размере белка, который распознает антитело.
Окончательная оптимизация / титрование антител
После завершения первоначального титрования и получения в целом специфического сигнала следующим шагом будет изучение характеристик антитела в полноразмерных гелях.После переноса разрежьте мембрану, чтобы получить 4 отдельных блота, как показано ниже. Включение предварительно окрашенного маркера молекулярной массы в каждый кусок мембраны имеет решающее значение для обеспечения обнаружения сигнала с правильной молекулярной массой.
Рис. 2. Разрез мембраны для титрования антител.
Затем отдельные блоты можно инкубировать с различными концентрациями первичного антитела, например A: 1/500 B: 1 / 1,000 C: 1 / 1,500 D: 1 / 2,000 E: только вторичный.Использование поликлонального вторичного антитела может быть выгодным, поскольку возможное связывание нескольких вторичных антител с эпитопами на первичном антителе обеспечивает амплификацию образца. Также рекомендуется использовать вторичные антитела, меченные HRP, для обнаружения белков с низким содержанием, поскольку хемилюминесценция более чувствительна, чем флуоресценция. Типичные разведения вторичного антитела варьируются от 1/2 000 до 1/10 000, но это должно быть оптимизировано методом проб и ошибок в соответствии с титрованием первичного антитела.
Чтобы оптимизировать количественный анализ белка, мы рекомендуем использовать гели, не содержащие пятен Bio-Rad’s Criterion. Причина этого в том, что многие домашние белки (HKP) присутствуют в образцах в очень высоких количествах. Это может сделать их обнаружение и обнаружение вашей плохо выраженной цели в линейном диапазоне чрезвычайно трудным. При отсутствии пятен Criterion нормализация общего белка представляет собой более последовательный метод нормализации, позволяющий проводить длительные экспозиции для обнаружения слабо экспрессируемого целевого белка.Щелкните здесь, чтобы получить дополнительную информацию о технологии удаления пятен Bio-Rad.
Рис. 3. Сравнение нормализации общего белка с использованием не окрашивания Bio-Rad и нормализации с использованием некоторых обычных домашних белков.
Вернуться наверх
Обнаружение сигнала
В конечном итоге целью является обнаружение сигнала антитело / антиген в линейном диапазоне. Линейный динамический диапазон — это диапазон, в котором интенсивность сигнала пропорциональна количеству белка на блоте.
Рис. 4. Хемилюминесцентный блот серии разведений очищенного бычьего актина и трех неизвестных количеств актина. Отрегулированный фоновый объем сигнала каждой полосы в серии разведений наносили на график в зависимости от количества белка для построения стандартной кривой. Была рассчитана линейная аппроксимация точек данных и показано соответствующее значение R2 для актина. Высокое значение R2 указывает на сильную линейную зависимость между объемом сигнала и количеством белка в широком динамическом диапазоне.
Линейная зависимость между белком и сигналом позволяет проводить количественный анализ с определенной степенью уверенности. Точно так же при работе с клеточным или тканевым лизатом можно использовать серии разведений с различными количествами образца, чтобы гарантировать, что количественные измерения проводятся в линейных условиях. При обнаружении и количественной оценке белков с низким содержанием белков компания Bio-Rad рекомендует клиентам разрабатывать блоты с использованием субстрата Bio-Rad Clarity Western ECL Substrate, который имеет большую продолжительность сигнала (24 часа), очень высокое отношение сигнал / шум и чувствительность на уровне средней фемтограммы. .Если требуется более высокая чувствительность, используйте Bio-Rad’s Clarity Max Western ECL Substrate ™, который имеет чувствительность на уровне низких фемтограмм и специально разработан для обнаружения очень низких количеств целевого белка.
Рис. 5. На графике показан сигнал, обнаруженный при вестерн-блоттинге с использованием различных субстратов ECL.
Рис. 6. На графике показан сигнал, обнаруженный при вестерн-блоттинге с использованием различных высокочувствительных субстратов ECL.
Проявите блот, используя формирователь изображения на основе ПЗС-камеры, такой как ChemiDoc ™ от Bio-Rad, а не пленку, поскольку формирователь изображения на основе ПЗС-камеры более чувствителен и более точно обнаруживает в динамическом линейном диапазоне.
Фиг. 7. Вестерн-блоттинг, показывающий специфическую и поддающуюся количественной оценке экспрессию.
Подготовка образцов, гель-электрофорез, перенос и иммуноблоттинг должны быть оптимизированы для надлежащего обнаружения белков с помощью вестерн-блоттинга.Это еще более актуально, когда целевой белок экспрессируется на низких уровнях в вашем образце.
Вернуться наверх
Дальнейшее чтение
После завершения процесса оптимизации должно быть возможно обнаружение сигнала антитела / антигена в пределах измеримого линейного диапазона. Чтобы узнать о дальнейших стратегиях или устранении неполадок вестерн-блоттинга, посетите ресурсы для вестерн-блоттинга компании Bio-Rad:
Редкое «огненное кольцо» солнечного затмения: загипнотические снимки со всего мира
Вид затмения из астрономического центра Аль-Турая в Дубае, Объединенные Арабские Эмираты.
Франсуа Нель / ГеттиПервое из двух солнечных затмений 2020 года превратило Солнце в светящееся «огненное кольцо» в воскресенье. Люди, живущие на узкой полосе света, в некоторых частях Африки и Азии, были немногими счастливчиками, которые смогли воочию увидеть редкое «кольцевое» затмение.
Кольцевое солнечное затмение происходит, когда Луна находится слишком далеко от Земли, чтобы полностью скрыть Солнце, оставляя кольцо солнечного света вокруг Луны.Так эти типы затмений получили свое поэтическое прозвище «огненное кольцо».
Из космоса в ваш почтовый ящик. Получайте последние новости о космосе от CNET каждую неделю.
Полное кольцевое затмение было видно в некоторых частях Африки, Ближнего Востока и Азии в течение всего воскресенья. В Северной Индии произошло почти полное затмение, при этом 99,4% солнца было заблокировано во время пика.
Ниже мы собрали некоторые из лучших изображений, фильтрующих в Интернете.Мы будем продолжать обновлять эту статью, добавляя некоторые из лучших, которые мы находим.
Роскосмос, российское космическое агентство, сделало несколько замечательных снимков с космодрома Байконур, стартовой площадки для астронавтов НАСА за последние девять лет.
21 июня в ряде регионов России могло произойти частичное # солнечное затмение. В 2020 году это астрономическое событие совпало с летним солнцестоянием.
Примечательно, что кольцевое солнечное затмение началось в 04:48 UTC в Центральной Африке с самой длинной фазой, видимой в Гималаях за 38 секунд рис.twitter.com/94XsID6SHo
— РОСКОСМОС (@roscosmos) 21 июня 2020 г.
Индийский журналист Панкадж Джайн запечатлел этот эпический снимок.
Кольцо произошло вскоре после полудня по местному времени в Сирсе, Индия.На этом кадре из потока YouTube Time and Date видно призрачное оранжевое кольцо, окружающее затененную луну.
Это огненное кольцо.
Время и дата YouTubeОблачное небо над некоторыми частями Индии создавало поразительные видения.
Конечно, не все было чисто. ..
Это не единственное затмение в году. Полное солнечное затмение ожидается 14 декабря для зрителей в некоторых частях Южной Америки.
Супер кровавый волк, луна, лунное затмение ослепляет яркими фотографиями
Посмотреть все фотоSyngene G: BOX Mini 6 или 9 | Документация по гелю и визуализация вестерн-блоттинга
Syngene — самая популярная система документации гелей в Новой Англии
Если необработанные данные, высокая чувствительность, разрешение изображения, доступная цена и отличный сервис являются важными факторами при принятии решения о системе визуализации геля, свяжитесь с нами или позвоните по телефону (617) 286-4632.
Компактная флюоресцентная и химическая система вестерн-блоттинга
Вам нужно количественно определить несколько различных флуоресцентных белков на одном блоте и получить изображения хеми-блотов, но ваша лаборатория ограничена в пространстве? Тогда G: BOX mini — это именно то, что вы так долго искали. Благодаря опциям возбуждения без пятен, RGB и ИК для красителей Alexa Fluor ® 488, 546, 647 и ИК, вы всего в одном клике от блестящих мультиплексных изображений с одного вестерна.
Используя G: BOX mini, вы также получите идеально экспонированные изображения ваших химически маркированных белков без необходимости снимать пленку.Просто поместите свой блот в темную комнату, нажмите на программу захвата GeneSys, и ваш тепловизор сделает все остальное без суеты и без грязных химикатов.
G: BOX mini — это компактная многофункциональная система визуализации, сочетающая в себе уникальный предметный столик с приводом от двигателя и охлаждаемую камеру с высоким разрешением 6 или 9 мегапикселей, позволяющую создавать точные оптические изображения, а не только улучшенные в цифровой форме. С G: BOX mini вы увидите отдельные близкие химические и флуоресцентные полосы или пятна даже на сложных гелях и узнаете, что они действительно являются частью ваших данных.
Варианты освещенияHI-LED покрывают весь спектр высокоинтенсивного синего, зеленого, красного и инфракрасного цветов, что позволяет сократить время экспозиции и улучшить качество изображений.
Система управляется программным обеспечением для захвата изображений GeneSys и поставляется в комплекте с неограниченным количеством копий аналитического программного обеспечения GeneTools.
Элемент
Компактная флюоресцентная и химическая система вестерн-блоттинга
- Компактность
Оставляет много места на любом лабораторном столе - Варианты освещения RGB и IR HI-LED
Быстрая количественная оценка нескольких флуоресцентных белков без удаления и повторного зондирования - Возможность визуализации без пятен
Захват изображений акриламидных гелей TGX Stain-Free ™ FastCast ™ и многих других - Камера с высокой квантовой эффективностью (QE)
Определение пикограмм или фемтограмм - Роскошный объектив (F / 0. 95 с приводом от двигателя) с обратной связью по данным
Получение изображений высочайшего качества - Автоматический столик с моторным приводом и автоматической фокусировкой
Для реальных оптических изображений - Варианты белого, УФ и синего освещения
Изображение всех типов гелей и пятен в одной системе - Продуманный вариант крепления экрана
Простое и надежное крепление монитора - Программа захвата изображений GeneSys, управляемая приложением
Содержит обширную базу данных красителей и протоколов визуализации.Все, что вам нужно знать, это тип используемого геля, и GeneSys автоматически выбирает оптимальное освещение и фильтры для получения идеального изображения - Программа анализа GeneTools (неограниченное количество копий)
Анализируйте данные на своем компьютере